Pseudoalteromonas carrageenovora芳香基硫酸酯酶突变文库热稳定性提高突变体的筛选及鉴定

• 作者: 乔超超 倪辉 朱艳冰 李鹤宾 王新侠 肖安风
• 来源期刊: 食品科学
• 学科: 生物学
• 关键词: 芳香基硫酸酯酶 易错聚合酶链式反应 热稳定性提高 突变体性质
• 年，卷（期）: 2017,（10）
• 所属期刊栏目: 生物工程
• 页码范围: 18-23
• 页数: 6页
• 分类号: Q814.9
• 字数: 4922字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7506/spkx1002-6630-201710004

摘要

利用易错聚合酶链式反应技术引入随机诱变,构建一个Pseudoalteromonas carrageenovora芳香基硫酸酯酶突变体库.经过筛选,获得一个芳香基硫酸酯酶热稳定性提高的突变株4-153.序列分析表明,该突变体有2个氨基酸替换,包括D84A和H260L.以对硝基苯硫酸钾为底物,突变酶4-153 (M4-153)的最适反应温度为55℃,在45、50、55、60℃处理30 min后,M4-153分别保留85％、83％、48％和13％的残留酶活力.野生型酶(WT)在45、50、55、60℃处理30 min后,分别保留79％、68％、21％和1％的残留酶活力.M4-153与WT相比具有更好的热稳定性.M4-153的最适反应pH值为8.0,在pH 5.0～9.0范围内保持稳定.EDTA对突变酶的抑制作用表明,金属离子在突变酶的催化过程中起重要作用.M4-153对一些洗涤剂,包括Triton X-100、Tween 20、Tween 80和Chaps,有好的耐受性.M4-153对龙须菜粗多糖硫酸基团的脱硫率为79.5％.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	倪辉	集美大学食品与生物工程学院	155	1014	16.0	24.0
2	肖安风	集美大学食品与生物工程学院	48	217	10.0	13.0
3	朱艳冰	集美大学食品与生物工程学院	18	30	4.0	5.0
4	乔超超	集美大学食品与生物工程学院	1	1	1.0	1.0
5	王新侠	集美大学食品与生物工程学院	1	1	1.0	1.0
6	李鹤宾	厦门医学院药学系	10	39	4.0	5.0