miR-15b通过靶向ABCG2信号通路抑制胶质瘤干细胞迁移及侵染

• 作者: 刘义锋 周国平 张保朝 张敬伟 李巍 汪宁 温昌明 贺海发 闻公灵
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 干细胞 肿瘤干细胞 胶质瘤干细胞 miR-15b 迁移 侵染 ABCG2 国家自然科学基金
• 年，卷（期）: 2017,（33）
• 所属期刊栏目: 肿瘤干细胞
• 页码范围: 5305-5312
• 页数: 8页
• 分类号: R394.2
• 字数: 8155字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2017.33.010

摘要

背景:miR-15b在肿瘤起始和发展过程中发挥重要作用,于是作者推测miR-15b可能参与调解胶质瘤干细胞细胞的迁移和侵染,而这目前尚无相关报道,并且其机制也不清楚.目的:探讨miR-15b对胶质瘤干细胞迁移和侵染的影响及相关分子机制.方法:实时荧光定量PCR检测胶质瘤组织、正常成人脑组织,胶质瘤干细胞及非胶质瘤干细胞中miR-15b的表达情况.①分别以ABCG2特异性siRNA、对照siRNA转染胶质瘤干细胞;②分别以miR-15抑制物、miR-15模拟物及miR-对照分别转染胶质瘤干细胞.转染后48 h,Transwel检测细胞迁移和侵染能力,ELISA法和明胶酶谱实验检测细胞培养上清中基质金属蛋白酶2/9蛋白量及活性变化.将胶质瘤干细胞及非胶质瘤干细胞分别注入裸鼠皮下,30 d内观察成瘤情况.结果与结论:①与正常脑组织相比,胶质瘤中miR-15b的表达明显较低且与胶质瘤所处阶段呈负相关性.与非胶质瘤干细胞相比,胶质瘤干细胞中miR-15b的表达显著下调;②与miR-对照组比较,miR-15b模拟物组细胞迁移及侵染能力显著下降(P<0.01),miR-15b抑制物组细胞迁移及侵染能力显著增加(P<0.01);TargetScan生物学软件预测表明ABCG2为miR-15b潜在的靶基因;③与对照siRNA组比较,ABCG2 siRNA组细胞迁移及侵染能力显著下降(P<0.01);④ELISA检测表明,上调miR-15b基因表达显著抑制基质金属蛋白酶2/9蛋白的表达;⑤ELISA法和明胶酶谱实验检测结果表明,ABCG2 siRNA转染可显著抑制基质金属蛋白酶2/9蛋白的活性,但不影响其表达量;⑥裸鼠体内实验表明,胶质瘤干细胞具有更强的成瘤能力;⑦结果表明,miR-15b通过靶作用于ABCG2调控胶质瘤干细胞的迁移和侵染,上调miR-15b表达可抑制胶质瘤干细胞的迁移和侵染.