花生主要变应原Ara h2的克隆及原核表达

• 作者: 周珍文 李飞 梁秉绍 董慧 陈吟霜 黄艳梅
• 来源期刊: 现代生物医学进展
• 学科: 医学
• 关键词: 花生 变应原 Ara h2 克隆 表达
• 年，卷（期）: 2017,（4）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 624-627
• 页数: 4页
• 分类号: Q78|R392.8
• 语种: 中文
• DOI: 10.13241/j.cnki.pmb.2017.04.006

摘要

目的:在原核载体中克隆、表达花生主要变应原Ara h2,为其重组变应原应用研究奠定基础.方法:合成花生主要变应原Ara h2基因,设计特异性引物行PCR扩增,经EcoRⅠ、Hind Ⅲ双酶切后与做相应酶切的pET-28a载体连接,转化大肠杆菌BL21,提取质粒进行双酶切鉴定及测序分析,使用IPTG诱导融合蛋白表达,使用Ara h2特异性多克隆抗体对表达产物进行免疫印迹鉴定.结果:成功扩增了Ara h2基因,重组质粒双酶切见目的条带,基因测序显示Ara h2在正确开放阅读框中,基因长423bp,编码140个氨基酸,预测的等电点为5.3,分子量约16660.17 Da,基因比对分析显示其与相关报道的核苷酸序列一致性达100％.重组pET-28a-Ara h2/BL21经0.6 mmol/L IPTG诱导表达可见重组融合蛋白在相应分子量大量表达,使用Ara h2多克隆抗体免疫印迹法能检测到目的蛋白.结论:成功克隆、表达了花生主要变应原Ara h2,为其重组变应原应用研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈吟霜	广州医科大学广州市妇女儿童医疗中心	2	6	1.0	2.0
2	董慧	广州医科大学广州市妇女儿童医疗中心	1	1	1.0	1.0
3	梁秉绍	广州医科大学广州市妇女儿童医疗中心	1	1	1.0	1.0
4	黄艳梅	广州医科大学广州市妇女儿童医疗中心	1	1	1.0	1.0
5	李飞	广州医科大学广州市妇女儿童医疗中心	1	1	1.0	1.0
6	周珍文	广州医科大学广州市妇女儿童医疗中心	1	1	1.0	1.0