高效Pdx1/insulin双报告基因载体的构建及其初步应用

• 作者: 叶玲玲 孙海燕 李世崇 王启伟 蓝三春 陈昭烈
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 组织构建 组织工程 诱导多能干细胞 Pdx1 insulin 双报告基因 胰岛β细胞 诱导分化 国家自然科学基金
• 年，卷（期）: 2017,（12）
• 所属期刊栏目: 组织构建细胞学实验
• 页码范围: 1903-1908
• 页数: 6页
• 分类号: R318
• 字数: 5437字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2017.12.017

摘要

背景:胰岛细胞移植是治疗1型糖尿病最有效的方法之一,然而移植细胞来源短缺限制了其临床应用.多能干细胞有望成为胰岛细胞移植的理想种子细胞,但其向胰岛β细胞分化是一个复杂的过程.目的:构建高效Pdx1/insulin双报告基因载体,探讨其实时监测诱导多能干细胞向胰岛β细胞分化中关键性基因表达的可行性.方法:首先在pTiger载体上引入嘌呤霉素抗性,然后以646 bp的小鼠Ins1启动子替换了原来载体上410 bp的小鼠Ins1启动子,获得高效Pdx1/insulin双报告基因载体.最后,将载体导入INS-1细胞和诱导多能干细胞,验证其功能.结果与结论:①实验成功构建了高效Pdx1/insulin双报告基因载体;②在INS-1细胞中验证了载体获得嘌呤霉素抗性,提高了insulin表达效率,并在INS-1细胞中检测到Pdx1和insulin的表达;③实验初步证明了Pdx1/insulin双报告基因能够有效监测细胞分化过程中Pdx1和insulin基因的表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李世崇	军事医学科学院生物工程研究所	47	184	7.0	10.0
2	陈昭烈	军事医学科学院生物工程研究所	62	367	9.0	16.0
3	叶玲玲	军事医学科学院生物工程研究所	36	103	5.0	7.0
4	王启伟	军事医学科学院生物工程研究所	17	34	3.0	3.0
5	孙海燕	解放军307医院口腔科	2	1	1.0	1.0
6	蓝三春	解放军307医院造血干细胞移植科	1	0	0.0	0.0