低氘水对人肺癌细胞 A549增殖和分化的影响及机制

• 作者: 丛峰松 戚冰雪 李子宜
• 来源期刊: 山东医药
• 学科: 医学
• 关键词: 肺癌 低氘水 细胞周期 丝裂原活化的细胞外信号调节激酶 细胞分化
• 年，卷（期）: 2017,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1-4
• 页数: 4页
• 分类号: R734.2
• 字数: 3036字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-266X.2017.06.001

摘要

目的：研究低氘水（ DDW）对人肺癌A549细胞增殖和分化的影响，并探讨其作用机制。方法取A549细胞分为观察组和对照组，分别用氘含量为50 ppm的DDW配制的培养基、正常水配制的培养基培养30 d，倒置显微镜下观察两组细胞形态，用CCK-8法测定48 h内细胞生长情况。观察组和对照组细胞先分别在无血清的DDW培养基和正常水培养基中培养48 h使细胞生长同步化，然后分别加入含10％血清的DDW培养基和正常水培养基继续培养，用碘化丙啶染色和流式细胞分析仪测定两组36、48 h时处于细胞周期G1、S和G2／M期的细胞比例；取两组细胞裂解液，抽提细胞总蛋白，Western blot法检测丝裂原活化的细胞外信号调节激酶（ MEK1）、表皮生长因子受体（ EGFR）表达，MEK1第217和第298位丝氨酸磷酸化水平，EGFR第1016和第1110位酪氨酸磷酸化水平；比较两组肺泡Ⅰ型上皮细胞特异性蛋白标志物AQP5、T1a和肺泡Ⅱ型上皮细胞特异性蛋白标志物SPB、SPC1、SPC2、CFTR的表达。结果对照组细胞呈立方形、细胞间紧密接触和堆积生长，观察组细胞呈纺锤形、细胞伸长、细胞间接触较松散。观察组36、48 h时的OD值均较对照组降低（P均＜0．05）。血清饥饿后再刺激36 h，观察组处于G1期的细胞比例为71．75％，高于对照组的57．01％；观察组处于S期的细胞比例为22．43％，低于对照组的35．88％（ P均＜0．01）；48 h时两组细胞周期比例比较差异无统计学意义。两组MEK1、EGFR表达及EGFR第1016位和第1110位酪氨酸磷酸化水平比较差异无统计学意义，观察组MEK1第217位和第298位丝氨酸磷酸化的水平降低（ P均＜0．01）。观察组SPC2水平较对照组升高（P＜0．01）。结论 A549细胞用DDW长期培养，可显著抑制其细胞增殖和分化，其机制可能与降低MEK1的磷酸化水平、阻滞细胞周期G1／S期转变以及诱导A549细胞由Ⅱ型肺泡上皮细胞向Ⅰ型肺泡上皮细胞转化、提高细胞分化程度有关。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	丛峰松	上海交通大学生命科学技术学院	27	140	7.0	11.0
2	戚冰雪	上海交通大学生命科学技术学院	1	4	1.0	1.0
3	李子宜	上海交通大学生命科学技术学院	1	4	1.0	1.0