晚期糖基化终末产物可通过调节V-ATPase a3与CIC-7影响破骨细胞的泌酸功能

• 作者: 张紫机 张阳春 李子卿 李朝红 杨兴 王海兴 盛璞义 肖胤勃
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 组织构建 骨细胞 糖基化终末产物 破骨细胞 骨吸收功能 空泡型质子泵V-ATPase 氯离子通道ClC-7 吖啶橙染色 破骨细胞泌酸 国家自然科学基金
• 年，卷（期）: 2017,（12）
• 所属期刊栏目: 骨组织构建
• 页码范围: 1826-1832
• 页数: 7页
• 分类号: R318
• 字数: 7938字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2017.12.004

摘要

背景:晚期糖基化终末产物对破骨细胞骨吸收功能的影响存在争议,作者的前期研究表明晚期糖基化终末产物作用于破骨细胞前体可显著抑制骨吸收功能,但关于其对破骨细胞泌酸功能的影响尚不明晰.目的:探究晚期糖基化终末产物对破骨细胞泌酸功能的影响及其机制.方法:以15μg/L的RANKL对破骨细胞前体RAW 264.7进行定向诱导(正常组),实验组中另加入50-400 mg/L不等的晚期糖基化终末产物及对照用牛血清白蛋白(100 mg/L).通过骨吸收实验验证晚期糖基化终末产物对骨吸收的抑制效应,并以吖啶橙染色观察晚期糖基化终末产物对破骨细胞泌酸功能的影响;进一步检测质子泵V-ATPase a3及氯离子通道CIC-7的表达情况,分析晚期糖基化终末产物影响破骨细胞泌酸的相关机制.结果与结论:①晚期糖基化终末产物组的骨吸收面积较正常组显著减少(P<0.05);②吖啶橙染色显示晚期糖基化终末产物组的红色荧光(620 nm)强度较正常组显著减少(P<0.05),抑制程度随着刺激浓度的增高而加重;③免疫细胞化学染色、蛋白质免疫印迹及PCR发现,晚期糖基化终末产物组的V-ATPase a3及CIC-7表达量均较正常组显著下降(P<0.05);④综上结果表明,晚期糖基化终末产物作用于破骨细胞前体可显著抑制破骨细胞的泌酸功能,其机制可能与晚期糖基化终末产物抑制了质子泵V-ATPase a3及氯离子通道CIC-7的表达相关.