成纤维细胞生长因子19转录活性及上游结合元分析

• 作者: 张菁 徐宜兰 方启晨 白宁宁 陈淑芹
• 来源期刊: 医学研究杂志
• 学科: 医学
• 关键词: FGF19 转录调控 启动子 质粒构建
• 年，卷（期）: 2017,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 75-79
• 页数: 5页
• 分类号: R5
• 字数: 3520字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11969/j.issn.1673-548X.2017.06.020

摘要

目的 构建FGF19基因启动子区荧光素酶报告基因质粒,并研究分析其启动子区的转录活性和结合元件.方法 设计特异性引物PCR扩增基因组DNA,得到长为3323bp的FGF19基因启动子区片段,将此PCR产物插入荧光素酶报告基因载体pGL3-Basic Vector,获得全长为3323bp的FGF19基因启动子区荧光素酶报告基因质粒.在此基础上设计特异性引物,构建5’端系列缺失荧光素酶报告基因质粒.通过瞬时转染实验检测所构建质粒的相对荧光素酶活性,分析不同启动子区片段对FGF19基因转录活性的影响,并用软件预测影响启动子转录活性的关键转录因子.结果 构建了7个FGF19基因启动子区荧光素酶报告基因质粒,经双酶切和测序验证均正确.瞬时转染及荧光素酶报告基因分析实验发现启动子区-2351～-2316是调控FGF19启动子转录活性的重要序列,且在线软件预测该序列存在潜在的转录因子位点.结论 FGF19基因启动子区-2351 ～-2316是调控其启动子转录活性的关键位置.