K-ras第12密码子突变对K-ras蛋白自身活性及下游信号通路的影响

• 作者: 张禾 徐新民 李瑾 杨路焕 田馨园 蔡剑平
• 来源期刊: 医学研究杂志
• 学科: 医学
• 关键词: K-ras突变 K-ras活性 PAKT/AKT PMEK/MEK PERK/ERK
• 年，卷（期）: 2017,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 29-32,24
• 页数: 5页
• 分类号: R34
• 字数: 3996字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11969/j.issn.1673-548X.2017.06.008

摘要

目的 探讨K-ras第12密码子突变对K-ras蛋白自身活性及其下游信号通路的影响.方法 选用本室已构建好的稳定高表达WT、G12A、G12C、G12D、G12R、G12S和G12V型K-ras蛋白的cos7同源细胞株作为研究对象,通过GST-Raf-1 Ras结合域特异性结合Ras-GTP空间构象,免疫沉淀细胞内具有活性的K-ras蛋白,利用Western blot技术检测沉淀下来的Ras-GTP水平并进行比较分析;通过Western blot法检测K-ras下游信号通路中MER、ERK、ATK蛋白分子的磷酸化水平.结果 饥饿处理后表达野生型K-ras蛋白的cos7同源细胞株内RAS-GTP水平较低,而表达G12A、G12C、G12D、G12R、G12S和G12V型K-ras蛋白的cos7同源细胞株内RAS-GTP水平活性为WT型K-ras蛋白3.5～40倍不等;表达K-ras突变蛋白的cos7同源细胞株内MEK、ERK和AKT的磷酸化水平比表达野生型K-ras蛋白的cos7同源细胞高,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 K-ras第12密码子突变导致K-ras蛋白自身永久活化,且不需要外源性生长因子的刺激;突变K-ras可以持续激活K-ras蛋白下游效应因子,使K-ras信号通路持久活化.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	徐新民	首都医科大学附属北京地坛医院检验科	26	115	6.0	9.0