钛学术
文献服务平台
学术出版新技术应用与公共服务实验室出品
首页
论文降重
免费查重
学术期刊
学术导航
任务中心
论文润色
登录
文献导航
学科分类
>
综合
工业技术
科教文艺
医药卫生
基础科学
经济财经
社会科学
农业科学
哲学政法
社会科学II
哲学与人文科学
社会科学I
经济与管理科学
工程科技I
工程科技II
医药卫生科技
信息科技
农业科技
数据库索引
>
中国科学引文数据库
工程索引(美)
日本科学技术振兴机构数据库(日)
文摘杂志(俄)
科学文摘(英)
化学文摘(美)
中国科技论文统计与引文分析数据库
中文社会科学引文索引
科学引文索引(美)
中文核心期刊
cscd
ei
jst
aj
sa
ca
cstpcd
cssci
sci
cpku
默认
篇关摘
篇名
关键词
摘要
全文
作者
作者单位
基金
分类号
搜索文章
搜索思路
钛学术文献服务平台
\
学术期刊
\
医药卫生期刊
\
医药卫生总论期刊
\
山东医药期刊
\
人DNMT3A基因慢病毒载体构建及其乳腺癌细胞MDA-MB-231稳定表达株的建立
人DNMT3A基因慢病毒载体构建及其乳腺癌细胞MDA-MB-231稳定表达株的建立
作者:
于林
张慧变
王媛
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
DNMT3A基因
慢病毒载体
MDA-MB-231细胞
乳腺癌
摘要:
目的 构建人类DNA甲基转移酶3A(DNMT3A)蛋白过表达慢病毒载体并建立乳腺癌细胞MDA-MB-231稳定表达株.方法 从乳腺癌细胞MDA-MB-231中提取总RNA,逆转录出含DNMT3A的cDNA;以DNMT3A的cDNA为模板,根据其CDS序列设计含有EcoRⅠ和BamHⅠ限制性内切酶位点的引物序列,采用PCR法扩增出带有双酶切位点的目的基因;采用双酶切法将目的片段连接到到慢病毒表达质粒pLVX-IRES-Hyg中,获得重组的pLVX-FLAG-DNMT3A表达载体.重组的pLVX-FLAG-DNMT3A表达载体通过与包装质粒共转染293T细胞,获得携带FLAG-DNMT3A的重组慢病毒.以慢病毒感染MDA-MB-231细胞,48 h后在培养基中加入1μg/μL的嘌呤霉素,筛选出稳定表达DNMT3A蛋白的细胞株,检测稳定株及野生型细胞DNMT3A蛋白及mRNA表达水平.结果 构建的重组质粒经菌落PCR、重组质粒双酶切、质粒PCR验证及测序比对鉴定正确.用病毒感染MDA-MB-231细胞,药物筛选后获得的过表达稳定株中,DNMT3A蛋白及mRNA表达水平分别为13.2±0.48、107.10±0.46,均高于野生型及空载对照.结论 成功构建了DNMT3A基因慢病毒表达载体pLVX-FLAG-DNMT3A,并在MDA-MB-231细胞中筛选出稳定表达DNMT3A的细胞株,为进一步探讨DNMT3A在乳腺癌中的作用提供了体外细胞系模型.
暂无资源
收藏
引用
分享
推荐文章
BLNK基因慢病毒载体构建及其稳定表达的人乳腺癌MDA-MB-231细胞株的筛选
BLNK
慢病毒载体
乳腺癌
MDA-MB-231
针对SATB1基因RNAi抑制人乳腺癌细胞MDA-MB-231侵袭性研究
SATB1
RNAi
乳腺癌
转移
逆转录病毒介导的SHP-1基因在乳腺癌MDA-MB-231细胞中的表达
SHp-1
酪氨酸磷酸酶
乳腺肿瘤
基因重组
逆转录病毒
慢病毒载体介导RNA干扰对乳腺癌MDA-MB-231细胞LOX基因表达的影响
乳腺癌
赖氨酰氧化酶
RNA干扰
内容分析
文献信息
引文网络
相关学者/机构
相关基金
期刊文献
内容分析
关键词云
关键词热度
相关文献总数
(/次)
(/年)
文献信息
篇名
人DNMT3A基因慢病毒载体构建及其乳腺癌细胞MDA-MB-231稳定表达株的建立
来源期刊
山东医药
学科
生物学
关键词
DNMT3A基因
慢病毒载体
MDA-MB-231细胞
乳腺癌
年,卷(期)
2017,(42)
所属期刊栏目
论著
研究方向
页码范围
5-8
页数
4页
分类号
Q591.2|Q784
字数
3129字
语种
中文
DOI
10.3969/j.issn.1002-266X.2017.42.002
五维指标
作者信息
序号
姓名
单位
发文数
被引次数
H指数
G指数
1
王媛
74
725
14.0
23.0
2
张慧变
2
1
1.0
1.0
3
于林
4
1
1.0
1.0
传播情况
被引次数趋势
(/次)
(/年)
引文网络
引文网络
二级参考文献
(0)
共引文献
(0)
参考文献
(16)
节点文献
引证文献
(0)
同被引文献
(0)
二级引证文献
(0)
2003(1)
参考文献(1)
二级参考文献(0)
2005(1)
参考文献(1)
二级参考文献(0)
2006(2)
参考文献(2)
二级参考文献(0)
2007(1)
参考文献(1)
二级参考文献(0)
2008(1)
参考文献(1)
二级参考文献(0)
2009(2)
参考文献(2)
二级参考文献(0)
2010(1)
参考文献(1)
二级参考文献(0)
2011(2)
参考文献(2)
二级参考文献(0)
2012(1)
参考文献(1)
二级参考文献(0)
2014(2)
参考文献(2)
二级参考文献(0)
2015(1)
参考文献(1)
二级参考文献(0)
2017(1)
参考文献(1)
二级参考文献(0)
2017(1)
参考文献(1)
二级参考文献(0)
引证文献(0)
二级引证文献(0)
研究主题发展历程
节点文献
DNMT3A基因
慢病毒载体
MDA-MB-231细胞
乳腺癌
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
山东医药
主办单位:
山东卫生报刊社
出版周期:
周刊
ISSN:
1002-266X
CN:
37-1156/R
开本:
大16开
出版地:
济南市燕东新路6号
邮发代号:
24-8
创刊时间:
1957
语种:
chi
出版文献量(篇)
55362
总下载数(次)
42
总被引数(次)
199298
期刊文献
相关文献
1.
BLNK基因慢病毒载体构建及其稳定表达的人乳腺癌MDA-MB-231细胞株的筛选
2.
针对SATB1基因RNAi抑制人乳腺癌细胞MDA-MB-231侵袭性研究
3.
逆转录病毒介导的SHP-1基因在乳腺癌MDA-MB-231细胞中的表达
4.
慢病毒载体介导RNA干扰对乳腺癌MDA-MB-231细胞LOX基因表达的影响
5.
慢病毒载体对MDA-MB-231细胞中microRNA-18a-3P表达的影响
6.
构建RNA干扰真核表达载体靶向抑制乳腺癌细胞株MDA-MB-231内的VEGF-C表达之研究
7.
慢病毒介导的RSK4对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖的影响
8.
慢病毒介导的靶向干扰PARP-1基因乳腺癌稳定细胞株的构建
9.
乳腺癌扩增序列2基因RNA干扰慢病毒载体的构建及对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖的影响
10.
稳定表达HMGA2的人乳腺癌细胞株MDA-MB-231构建
11.
Zebularine对乳腺癌细胞株MDA-MB-231细胞增殖和SARI表达的影响
12.
PTEN 对乳腺癌细胞 MDA -MB -231增殖和迁移的影响
13.
转录因子Runx2对人乳腺癌MDA-MB-231细胞上皮-间充质转化能力的影响
14.
miR-760靶向CDK8基因对人乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖与迁移的影响
15.
用于活体成像的人三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞系的构建
推荐文献
钛学术
文献服务平台
学术出版新技术应用与公共服务实验室出品
首页
论文降重
免费查重
学术期刊
学术导航
任务中心
论文润色
登录
根据相关规定,获取原文需跳转至原文服务方进行注册认证身份信息
完成下面三个步骤操作后即可获取文献,阅读后请
点击下方页面【继续获取】按钮
钛学术
文献服务平台
学术出版新技术应用与公共服务实验室出品
原文合作方
继续获取
获取文献流程
1.访问原文合作方请等待几秒系统会自动跳转至登录页,首次访问请先注册账号,填写基本信息后,点击【注册】
2.注册后进行实名认证,实名认证成功后点击【返回】
3.检查邮箱地址是否正确,若错误或未填写请填写正确邮箱地址,点击【确认支付】完成获取,文献将在1小时内发送至您的邮箱
*若已注册过原文合作方账号的用户,可跳过上述操作,直接登录后获取原文即可
点击
【获取原文】
按钮,跳转至合作网站。
首次获取需要在合作网站
进行注册。
注册并实名认证,认证后点击
【返回】按钮。
确认邮箱信息,点击
【确认支付】
, 订单将在一小时内发送至您的邮箱。
*
若已经注册过合作网站账号,请忽略第二、三步,直接登录即可。
期刊分类
期刊(年)
期刊(期)
期刊推荐
中国医学
临床医学
五官科学
内科学
医疗保健
医药卫生总论
基础医学
外科学
大学学报
妇产科学与儿科学
特种医学
皮肤病学与性病学
神经病学与精神病学
肿瘤学
药学
预防医学与卫生学
山东医药2022
山东医药2021
山东医药2020
山东医药2019
山东医药2018
山东医药2017
山东医药2016
山东医药2015
山东医药2014
山东医药2013
山东医药2012
山东医药2011
山东医药2010
山东医药2009
山东医药2008
山东医药2007
山东医药2006
山东医药2005
山东医药2004
山东医药2003
山东医药2002
山东医药2001
山东医药2000
山东医药2017年第9期
山东医药2017年第8期
山东医药2017年第7期
山东医药2017年第6期
山东医药2017年第5期
山东医药2017年第48期
山东医药2017年第47期
山东医药2017年第46期
山东医药2017年第45期
山东医药2017年第44期
山东医药2017年第43期
山东医药2017年第42期
山东医药2017年第41期
山东医药2017年第40期
山东医药2017年第4期
山东医药2017年第39期
山东医药2017年第38期
山东医药2017年第37期
山东医药2017年第36期
山东医药2017年第35期
山东医药2017年第34期
山东医药2017年第33期
山东医药2017年第32期
山东医药2017年第31期
山东医药2017年第30期
山东医药2017年第3期
山东医药2017年第29期
山东医药2017年第28期
山东医药2017年第27期
山东医药2017年第26期
山东医药2017年第25期
山东医药2017年第24期
山东医药2017年第23期
山东医药2017年第22期
山东医药2017年第21期
山东医药2017年第20期
山东医药2017年第2期
山东医药2017年第19期
山东医药2017年第18期
山东医药2017年第17期
山东医药2017年第16期
山东医药2017年第15期
山东医药2017年第14期
山东医药2017年第13期
山东医药2017年第12期
山东医药2017年第11期
山东医药2017年第10期
山东医药2017年第1期
关于我们
用户协议
隐私政策
知识产权保护
期刊导航
免费查重
论文知识
钛学术官网
按字母查找期刊:
A
B
C
D
E
F
G
H
I
J
K
L
M
N
O
P
Q
R
S
T
U
V
W
X
Y
Z
其他
联系合作 广告推广: shenyukuan@paperpass.com
京ICP备2021016839号
营业执照
版物经营许可证:新出发 京零 字第 朝220126号