长链非编码RNA结肠癌相关转录物2在人骨肉瘤组织的表达及其对人骨肉瘤MG63细胞生物学行为的影响

• 作者: 关红亚 刘嘉 尚国伟 曹巍 李月白 王义生 王亚东 连鸿凯
• 来源期刊: 中华实验外科杂志
• 关键词: 长链非编码RNA 骨肉瘤 结肠癌相关转录物2 增殖 侵袭
• 年，卷（期）: 2017,（11）
• 所属期刊栏目: 骨外科
• 页码范围: 1847-1850
• 页数: 4页
• 字数: 2612字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1001-9030.2017.11.011

摘要

目的 检测长链非编码RNA (lncRNA)结肠癌相关转录物2(CCAT2)在人骨肉瘤中的表达并观察其对人骨肉瘤MG63细胞增殖、侵袭和凋亡能力的影响.方法 采用实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测20例人骨肉瘤患者癌组织及癌旁组织CCAT2的表达和人骨肉瘤MG63细胞与正常成骨细胞hFOB1.19的CCAT2表达.合成针对CCAT2的特异性小干扰RNA(si-CCAT2),通过脂质体介导,将其转染入MG63细胞,实验分为空白对照组、小干扰RNA (siRNA)-NC组、siRNA-1组和siRNA-2组,后利用RT-qPCR技术检测4组细胞中CCAT2的表达量,验证siRNA沉默效果;细胞计数试剂盒(CCK-8)、Transwell实验和流式细胞术分别检测细胞的增殖、侵袭和凋亡能力.结果 CCAT2在人骨肉瘤组织和正常组织中的相对表达水平为2.448±1.013和1.551 ±0.769,两者差异有统计学意义(t =3.295,P=0.002);在MG63细胞和hFOB1.19细胞的相对表达水平为2.357±0.157和1.329±0.498,两者差异有统计学意义(t=2.566,P=0.020).沉默细胞中CCAT2后,与NC组(1.064±0.092)和空白对照组(1.076±0.135)比较,siRNA-1和siRNA-2组CCAT2表达量(0.499±0.030、0.519±0.097)明显下降(tsiRNA-1组=7.248,PsiRNA-1组=0.002;tsiRNA-2组=5.814,PsiRNA-2组=0.004).降低CCAT2的表达后,MG63细胞增殖活性明显下降,siRNA-1组和siRNA-2组平均细胞侵袭个数为(40.00±2.00)、(38.67±2.08)个,较NC组[(65.00±3.61)个]和空白对照组[(65.33±3.51)个]明显减少(tsiRNA-1组=10.857,PsiRNA-1组=0.001;tsiRNA-2组=11.314,PsiRNA-2组组=0.000);细胞凋亡能力[(44.76±2.49)％、(46.53±2.66)％]较NC组[(5.01±0.20)％]和空白组[(5.43±0.47)％]明显增加(tsiRNA-1组=26.832,PsiRNA-1组=0.000;tsiRNA-2组=26.370,PsiRNA-2组=0.000).结论 lncRNA CCAT2在人骨肉瘤组织和细胞中表达上调,抑制CCAT2的表达可显著抑制MG63细胞的增殖和侵袭,促进细胞的凋亡.