雌激素缺乏型人骨髓间充质干细胞肾虚表型的验证

• 作者: 何伟 杨鹏 洪郭驹 陈建发 陈达 陈镇秋 魏秋实
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 干细胞 骨髓干细胞 雌激素 骨髓间充质干细胞 芳香化酶 肾虚 表型 骨代谢疾病 国家自然科学基金
• 年，卷（期）: 2017,（5）
• 所属期刊栏目: 研究与报告 -- 骨髓干细胞
• 页码范围: 669-675
• 页数: 7页
• 分类号: R394.2
• 字数: 7287字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2017.05.003

摘要

背景：因雌激素缺乏导致绝经后骨质疏松症患者骨髓间充质干细胞增殖和成骨分化能力下降，从雌激素及其受体角度研究该病的发病机制和治疗策略具有重要意义。目的：观察雌激素缺乏型骨髓间充质干细胞的肾虚表型特点。方法：第3代骨髓间充质干细胞在成骨诱导条件下培养，用不同浓度(0，10-10，10-9，10-8，10-7 mol/L)芳香化酶抑制剂来曲唑干预细胞，未诱导的骨髓间充质干细胞作空白对照组。qPCR和Western Blot检测AROM mRNA和蛋白表达，MTT检测细胞增殖能力，碱性磷酸酶活性检测细胞成骨能力，ELISA检测细胞上清液中雌二醇水平，qPCR检测肾虚标志物cAMP mRNA表达。结果与结论：①10-8 mol/L来曲唑对骨髓间充质干细胞内AROM mRNA和蛋白的抑制效果最好；②培养72 h，10-8 mol/L来曲唑组细胞增殖能力最低；③培养第14天，10-8 mol/L来曲唑组细胞碱性磷酸酶活性低于其他组；④10-8 mol/L来曲唑组细胞上清液中雌二醇水平低于其他组；⑤10-8 mol/L组细胞cAMP mRNA表达低于其他组；⑥结果表明，10-8 mol/L来曲唑在成骨诱导环境中能明显抑制骨髓间充质干细胞增殖及向成骨分化，同时降低骨髓间充质干细胞内cAMP表达及合成和分泌雌二醇的能力，说明适宜浓度来曲唑作为AROM抑制剂建立的雌激素缺乏型骨髓间充质干细胞模型具有肾虚表型特征。