基于定向进化技术提高地衣芽孢杆菌L-天冬酰胺酶活性

• 作者: 别小妹 吕凤霞 张充 焦琳舒 赵海珍 邵泽香 陆兆新
• 来源期刊: 食品科学
• 学科: 工学
• 关键词: L-天冬酰胺酶 定向进化 酶活性
• 年，卷（期）: 2017,（22）
• 所属期刊栏目: 生物工程
• 页码范围: 8-13
• 页数: 6页
• 分类号: TS201.3
• 字数: 5510字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7506/spkx1002-6630-201722002

摘要

为提高地衣芽孢杆菌L-天冬酰胺酶活性,通过定向进化技术对其进行分子改造.经过两轮易错聚合酶链式反应和一轮DNA shuffling,从19 100多个突变株中筛选到突变体S10、S16和S21,其酶比活力较野生型分别提高了106％、74％和43％,且突变酶Kcat/Km都有所增大.其中,突变体S10氨基酸序列发生3个突变,K43E、N67S和1269L.三维模拟结果显示,第43位氨基酸突变为谷氨酸、第67位氨基酸突变为丝氨酸,可能提高了底物亲和力和催化效率,从而提高酶活性.圆二色谱分析表明,相比野生酶,突变酶的a-螺旋数减少、无规则卷曲有所增加,表明其刚性略有降低,柔性有所增加.利用定向进化策略能够有效地提高地衣芽孢杆菌L-天冬酰胺酶活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	别小妹	南京农业大学食品科技学院	134	1767	21.0	36.0
2	陆兆新	南京农业大学食品科技学院	253	4353	33.0	53.0
3	吕凤霞	南京农业大学食品科技学院	145	1968	21.0	38.0
4	赵海珍	南京农业大学食品科技学院	63	515	11.0	19.0
5	张充	南京农业大学食品科技学院	50	246	9.0	11.0
6	邵泽香	南京农业大学食品科技学院	2	2	1.0	1.0
7	焦琳舒	南京农业大学食品科技学院	4	10	2.0	3.0