miR-155通过抑制SMAD5调控成骨细胞骨分化

• 作者: 付希佳 杨军 白晓雪 邱诗阳
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 组织构建 骨细胞 成骨细胞 microRNA 分化 小鼠 SMAD5 细胞 碱性磷酸酶 qRT-PCR mRNA 国家自然科学基金
• 年，卷（期）: 2017,（4）
• 所属期刊栏目: 研究与报告 -- 骨组织构建
• 页码范围: 538-544
• 页数: 7页
• 分类号: R318
• 字数: 5057字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2017.04.008

摘要

背景：诱导成骨细胞分化为骨细胞是组织工程中的研究热点，但分化过程中的调节机制尚未完全阐明。MicroRNA是一类内源性小RNA分子，可通过与靶基因mRNA的3’端非编码区结合在转录后水平调控基因表达。研究证实，microRNA在骨细胞分化过程中起到重要的调节作用。<br>　　目的：研究miR-155对成骨细胞骨分化的调节作用以及作用机制。<br>　　方法：取小鼠成骨细胞系MC3T3-E1细胞，加入小鼠骨形态发生蛋白2(200μg/L)进行成骨诱导，并与诱导第1，3，7，14天，通过qRT-PCR检测miR-155 mRNA的表达。并将MC3T3-E1细胞分为对照组、诱导组、miR-155组和miR-155 inhibitor组，对照组用α-MEM培养基培养，诱导组在培养基中加入骨形态发生蛋白2进行成骨诱导，miR-155组和miR-155 inhibitor组在成骨诱导之前分别转染miR-155和miR-155拮抗剂，诱导2周。<br>　　结果与结论：①茜素红染色及碱性磷酸酶活性测定：经骨形态发生蛋白2诱导后，miR-155 mRNA表达呈时间依赖性下调。诱导组MC3T3-E1细胞茜素红着色强度、碱性磷酸酶活性和mRNA表达也显著高于对照组(P<0.01)；miR-155组茜素红着色强度明显低于诱导组，碱性磷酸酶活性和mRNA也明显低于对照组(P<0.01)，而miR-155 inhibitor组则呈反向变化(P<0.05)；②荧光报告基因检测和western blot检测：miR-155可与SMAD5 mRNA 3’非编码区结合，并明显降低MC3T3-E1细胞中SMAD5蛋白和mRNA表达(P<0.01)。结果表明，miR-155可通过负性调控SMAD5表达，抑制MC3T3-E1细胞的成骨分化。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨军	中国医科大学附属盛京医院南湖院区创伤骨科	398	1853	18.0	26.0
2	邱诗阳	中国医科大学附属盛京医院南湖院区创伤骨科	1	3	1.0	1.0
3	付希佳	朝阳市中心医院神经内科	1	3	1.0	1.0