腹腔注射博来霉素诱导小鼠肺纤维化模型的长期稳定性

• 作者: 李洪涛 江宁 涂常力 王振国 苏敏红 谢玉芬 郑晓滨 黄瑾
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 组织构建 组织工程 肺纤维化 转化生长因子β1 特发性肺间质纤维化 普通间质性肺炎 博来霉素 腹腔注射 小鼠 动物模型 动物实验 国家自然科学基金
• 年，卷（期）: 2017,（4）
• 所属期刊栏目: 技术与方法 -- 组织构建与生物力学
• 页码范围: 512-519
• 页数: 8页
• 分类号: R318
• 字数: 8022字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2017.04.004

摘要

背景：至今特发性肺间质纤维化尚无特效治疗药物，这与该疾病动物模型尚不能完全模拟特发性肺间质纤维化病理表现有极大关系，因此建立更理想的动物肺间质纤维化模型对研究人类特发性肺间质纤维化的发病机制及研制有效治疗药物显得至关重要。<br>　　目的：建立一种更符合人类特发性肺间质纤维化病理组织特征的小鼠肺纤维化模型。<br>　　方法：雄性C57BL/6小鼠70只，随机均分为两组，博来霉素每周2次组(A组)，腹腔注射博来霉素35 mg/kg，2次/周，共注射8次；博来霉素每周1次组(B组)腹腔注射博来霉素35 mg/kg，1次/周，共注射8次。分别于注射完第8次博来霉素后2，4，6，8，10周各处死5只小鼠，取肺组织进行羟脯氨酸测定、苏木精-伊红、Masson和免疫组织化学染色。<br>　　结果与结论：①两组在第8次腹腔注射后2，4，6，8，10周均出现不同程度的肺泡炎、肺纤维化。A组肺泡炎、肺纤维化评分于2周开始逐渐升高，于6-8周达高峰，持续至10周仍无明显降低；B组肺泡炎、肺纤维化评分于2周最高，随后逐渐波动式下降，至6周开始明显比A组评分低(P<0.05)；②兔疫组织化学显示Ⅰ型胶原蛋白主要沉积在胸膜下、血管周围和肺泡间隔，与 Masson 染色所见的胶原纤维分布一致；转化生长因子β1和α平滑肌动蛋白在肺泡炎和肺纤维化部位表达增多。A组小鼠肺Ⅰ型胶原蛋白、a-SMA、转化生长因子β1、羟脯氨酸含量于2周开始持续升高，于6-8周达峰值；B组于2周最高，随后逐渐降低，于4周时肺a-SMA和转化生长因子β1表达明显低于A组(P<0.05)，于6周时肺Ⅰ型胶原蛋白表达和羟脯氨酸含量明显低于A组(P<0.05)；③结果表明，1周2次腹腔注射博来霉素35 mg/kg诱导小鼠肺纤维化模型有极好的稳定性，且操作十分简单，可重复性好，其反复损伤修复过程、病理变化、细胞因子变化都与人类特发性肺间质纤维化类似，对研究人类肺纤维化，尤其是特发性肺间质纤维化有重要意义。