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摘要:
目的 探讨微小RNA-432(miR-432)对骨肉瘤细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其作用机制.方法 采用qRT-PCR技术检测人骨肉瘤细胞MG-63、人成骨细胞hFOB1.19中miR-432表达.将对数生长期MG-63细胞随机分为三组,分别转染miRNA对照质粒(miR-NC组)、miR-432抑制质粒(miR-432 inhibitor组)及miR-432过表达质粒(miR-432组),转染48 h时进行接种培养,分别检测细胞增殖(吸光度值)、迁移和侵袭情况.利用miRWalk和miRanda生物信息学软件预测miR-432靶基因可能为致癌基因CX3CL1,分别构建含有miR-432结合位点的CX3CL1基因3'-UTR区野生型(CX3CL1-wt)和突变型(CX3CL1-mut)荧光素酶报告载体.将MG-63细胞分别共转染CX3CL1-wt或CX3CL1-mut报告载体和miR-432载体(观察组),并设置共转染miR-NC载体作为对照组.转染48 h时,采用双荧光素酶试剂盒检测相对荧光素酶活性.结果 MG-63细胞中miR-432相对表达量低于hFOB1.19细胞(P<0.01).miR-NC组、miR-432 inhibitor组、miR-432组细胞中miR-432相对表达量分别为1.00±0.01、0.47±0.03、3.62±0.03,组间比较P均<0.01.miR-432组培养24、36、48 h的细胞吸光度值均明显低于miR-NC组、miR-432 inhibitor组,miR-432 inhibitor组均明显高于miR-NC组.miR-432 inhibitor组及miR-432组细胞相对迁移率分别为(122±7)%、(65±4)%,相对侵袭率分别为(189±25)%、(49±11)%;上述指标组间比较P均<0.05.CX3 CL1-wt和miR-432共转染MG-63细胞后,观察组相对荧光素酶活性低于对照组(P<0.05);CX3CL1-mut和miR-432共转染细胞后,对照组和观察组相对荧光素酶活性分别为1.00±0.11、0.93 ±0.13,两组比较P>0.05.结论 miR-432过表达可抑制骨肉瘤细胞增殖、迁移和侵袭,靶向调控致癌基因CX3CL1可能是其作用机制.
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文献信息
篇名 miR-432对骨肉瘤细胞增殖、迁移、侵袭的影响及机制
来源期刊 山东医药 学科 医学
关键词 骨肉瘤 微小RNA-432 细胞增殖 细胞迁移 细胞侵袭 CX3CL1
年,卷(期) 2017,(48) 所属期刊栏目 基础研究
研究方向 页码范围 37-39
页数 3页 分类号 R738.1
字数 2973字 语种 中文
DOI 10.3969/j.issn.1002-266X.2017.48.011
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1 韩康 29 139 4.0 11.0
2 荣辉 7 66 3.0 7.0
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细胞迁移
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山东医药
周刊
1002-266X
37-1156/R
大16开
济南市燕东新路6号
24-8
1957
chi
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