EdU标记兔外周血单个核细胞的体外增殖

• 作者: 冼碧琨 周敏仪 张和宁 彭宇婷 李志权 王文聪 甄栋钦 赵鸣雷 黄健发 黄冰 黎韦华
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 干细胞 分化 外周血单个核细胞 EdU标记 成体干细胞 细胞增殖 细胞移植
• 年，卷（期）: 2017,（9）
• 所属期刊栏目: 干细胞培养与分化
• 页码范围: 1432-1438
• 页数: 7页
• 分类号: R394.2
• 字数: 6788字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2017.09.022

摘要

背景:外周血单个核细胞群中含有外周血干细胞,其体外增殖情况仍不清楚,体内移植也缺乏良好的标记物.目的:以EdU作为标记物,观察外周血单个核细胞在干细胞培养基中的增殖情况,以及探讨EdU标记外周血干细胞的可行性.方法:分离新西兰兔外周血单个核细胞,在加入EdU的干细胞培养液中培养1-5 d;于不同的时间点观察细胞形态和进行细胞计数;收获细胞,进行EdU染色,观察EdU阳性细胞并检测阳性率.结果与结论:①刚分离出的外周血单个核细胞为类圆形,轮廓清晰;经过1d培养时,大部分细胞仍悬浮在培养液中,球形或类圆形,有细胞团出现,也见少量细胞散在贴壁,呈现三角形或多边形;培养2d时,可见较多细胞碎片,大多数细胞仍为类圆形;培养3-5d时,细胞碎片增多,细胞团体积变小,细胞密度明显降低;②随着培养时间的延长,细胞计数逐渐降低;③在培养1 d时,有散在EdU红色标记细胞;在培养2 d时,EdU红色标记细胞明显增多,并在培养三四天时维持不明显的变化;在培养5 d时,EdU红色标记的细胞明显减少;培养2 d时,EdU阳性细胞率最高,为(2.38±0.10)%;④结果表明,外周血单个核细胞群中增殖细胞率很低,EdU能标记外周血单个核细胞中有增殖能力的细胞.