人胎盘羊膜上皮细胞的分离鉴定及多向诱导分化

• 作者: 李萍 王久存 许惠利 陆瑶
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 干细胞 分化 羊膜上皮细胞 诱导分化 成脂细胞 成骨细胞 成软骨细胞
• 年，卷（期）: 2017,（9）
• 所属期刊栏目: 干细胞培养与分化
• 页码范围: 1420-1425
• 页数: 6页
• 分类号: R394.2
• 字数: 6495字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2017.09.020

摘要

背景:人羊膜上皮细胞来源稳定,正逐渐成为广受关注的再生医学种子细胞来源.目的:建立人羊膜上皮细胞体外分离培养、成脂、成软骨、成骨诱导分化的方法.方法:通过胰蛋白酶消化法从人胎盘羊膜中分离羊膜上皮细胞,进行体外培养与鉴定,观察培养12 d内的细胞生长曲线.取P1代羊膜上皮细胞,分别进行成脂、成软骨、成骨诱导,以常规培养细胞为对照,诱导16 d后,分别进行油红O染色、Masson染色及碱性磷酸酶染色,同时采用荧光定量PCR检测诱导过程中成脂转录因子、Ⅱ型胶原蛋白、骨桥蛋白、碱性磷酸酶mRNA表达变化.结果与结论:①从人羊膜中分离出的羊膜上皮细胞,免疫荧光检测表达上皮细胞标记物CK19;②P1代细胞具有较强的分裂增殖能力,P2细胞与P1相比增殖能力略有下降,P3细胞增殖能力最差;③羊膜上皮细胞经成脂、成软骨、成骨诱导后,油红O染色有红色脂滴,Masson染色有亮蓝色软骨基质,碱性磷酸酶染色有红褐色钙结节;随着诱导时间的延长,成脂转录因子、Ⅱ型胶原蛋白、骨桥蛋白、碱性磷酸酶表达量升高;④结果表明,采用酶消化法可从人羊膜中分离得到羊膜上皮细胞,羊膜上皮细胞可向脂肪细胞、成软骨细胞、成骨细胞分化.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李萍	上海复旦大学生命科学学院现代人类学教育部重点实验室	2	4	1.0	2.0
5	王久存	上海复旦大学生命科学学院现代人类学教育部重点实验室	2	10	2.0	2.0
6	陆瑶		1	3	1.0	1.0
7	许惠利		1	3	1.0	1.0