基因重组腺病毒载体与慢病毒载体转染兔骨髓间充质干细胞的对比

• 作者: 宁寅宽 李强 李诗鹏 石正松 蔡伟良 陶旋
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 干细胞 骨髓干细胞 慢病毒载体 腺病毒载体 骨髓间充质干细胞 基因转染 骨形态发生蛋白类 国家自然科学基金
• 年，卷（期）: 2017,（9）
• 所属期刊栏目: 骨髓干细胞
• 页码范围: 1340-1345
• 页数: 6页
• 分类号: R394.2
• 字数: 5556字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2017.09.006

摘要

背景:腺病毒载体和慢病毒载体均是较好的组织工程基因载体,两者在介导骨形态发生蛋白2转染兔骨髓间充质干细胞中的差异尚待探究.目的:比较腺病毒和慢病毒载体介导EGFP/骨形态发生蛋白2转染体外培养兔骨髓间充质干细胞的转导效率、持续时间及外源基因表达差异.方法:将第5代兔骨髓间充质干细胞分3组培养,A组以腺病毒载体介导EGFP/骨形态发生蛋白2(Ad-EGFP/BMP-2)转染细胞,B组以慢病毒载体介导EGFP/骨形态发生蛋白2(Lenti-EGFP/BMP-2)转染细胞,C组为未进行转染.转染24 h、48 h、72 h、1周、3周,检测EGFP基因表达;转染72 h后,免疫组织化学观察细胞骨形态发生蛋白2的表达;转染后72 h、1周、3周,Western blot检测骨形态发生蛋白2蛋白表达.结果与结论:①转染24 h后,A、B组可见EGFP表达,A组明显强于B组;转染48 h后,A、B组荧光进一步增强;转染72 h后,A组荧光强度近高峰,B组荧光持续增强.转染1周后,A组荧光强度开始下降,B组荧光强度仍然增强.转染3周后,A组荧光强度明显下降甚至消失,B组荧光强度有所下降,但仍然保持一定的表达.C组在各时间点均无EGFP表达;②A、B组胞浆均呈骨形态发生蛋白2阳性表达,C组呈阴性表达;③转染72 h后,A组骨形态发生蛋白2蛋白表达量强于B组;转染1周后,A组表达下降,B组表达增强并强于A组;转染3周后,A组表达微弱,B组持续表达且明显强于A组;④结果表明,相对腺病毒载体,慢病毒载体介导EGFP/骨形态发生蛋白2基因转染兔骨髓间充质干细胞在表达持续时间上具有一定的优势.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李强	桂林医学院附属医院急诊创伤外科	77	381	10.0	13.0
2	宁寅宽	桂林医学院附属医院急诊创伤外科	11	65	6.0	7.0
3	蔡伟良	桂林医学院附属医院急诊创伤外科	11	65	6.0	7.0
4	石正松	桂林医学院附属医院急诊创伤外科	9	43	4.0	6.0
5	李诗鹏	桂林医学院附属医院急诊创伤外科	5	32	3.0	5.0
6	陶旋	桂林医学院附属医院急诊创伤外科	5	24	3.0	4.0