人snail真核表达载体构建与鉴定

• 作者: 丁海霞 成健 杨乐 王冠杰 董济民 郭晓波 陈洪志
• 来源期刊: 现代生物医学进展
• 学科: 医学
• 关键词: Snail 重组质粒 载体构建
• 年，卷（期）: 2017,（3）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 410-413
• 页数: 4页
• 分类号: R-33|Q78
• 语种: 中文
• DOI: 10.13241/j.cnki.pmb.2017.03.003

摘要

目的:构建人snail基因真核表达载体并鉴定.方法:使用RT-PCR法获取人snail基因全长cDNA,经BamHⅠ、EcoRⅠ双酶切、连接,插入pcDNA3.1(+)真核表达载体,转化TOP10感受态细胞,用含氨苄青霉素的LB培养基筛选阳性克隆,提取质粒双酶切电泳及测序鉴定,瞬时转染siha细胞Western-blot从蛋白水平鉴定重组质粒在真核细胞内的表达.结果:pcDNA3.1-snail重组质粒经酶切电泳符合预期片段,测序鉴定插入片段与NCBI GenBank文库中人snail序列一致,重组质粒瞬时转染后snail蛋白表达量明显增高.结论:成功构建pcDNA3.1-snail重组质粒载体,为进一步探讨snail基因生物学功能奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨乐	西安交通大学附属西安市中心医院肿瘤科	8	53	3.0	7.0
2	董济民	西安交通大学附属西安市中心医院肿瘤科	4	3	1.0	1.0
3	郭晓波	西安交通大学附属西安市中心医院血液科	6	9	2.0	2.0
4	陈洪志	西安交通大学附属西安市中心医院肿瘤科	2	0	0.0	0.0
5	成健	西安交通大学附属西安市中心医院妇产科	1	0	0.0	0.0
6	丁海霞	西安交通大学附属西安市中心医院肿瘤科	1	0	0.0	0.0