人乳铁蛋白的沙漠小球藻表达系统的构建与鉴定

• 作者: 严国 汪文伦 牟云 王丹 王会敏 胡梦薇 许万云 高剑峰
• 来源期刊: 江苏农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 小球藻 人乳铁蛋白 表达系统 SDS-PAGE Western Blot 构建 鉴定
• 年，卷（期）: 2017,（19）
• 所属期刊栏目: 生物技术
• 页码范围: 138-142
• 页数: 5页
• 分类号: S188
• 字数: 4359字
• 语种: 中文
• DOI: 10.15889/j.issn.1002-1302.2017.19.030

摘要

为获得人乳铁蛋白的沙漠小球藻(Chlorella sp.GTD8A1)的表达系统和稳定的小球藻GTD8A1-hLF工程藻种,将人乳铁蛋白基因导入小球藻细胞中进行表达鉴定.以人血cDNA为模板,RT-PCR扩增得到人乳铁蛋白基因(GenBank登录号NM-002343.4),经Kpn Ⅰ和XbaⅠ双酶切后,连接到植物表达载体pCAMBIA2300-35S-OCS中,获得重组质粒载体pCAMBIA2300-35S-hLF-OCS,将重组质粒电击转入GTD8A1中,通过菌落PCR鉴定后扩大培养,在DNA和RNA水平分析人乳铁蛋白基因的整合和转录,SDS-PAGE和Western Blot分析获得70 ku的目的蛋白;将转基因藻种(GTD8A1-hLF)在BBM培养基中进行培养周期优化.结果表明,重组人乳铁蛋白在沙漠小球藻细胞中表达成功;通过Elisa测其人乳铁蛋白表达量在20d时达到最大,浓度为13.28 mg/L.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	高剑峰	石河子大学生命科学学院	92	349	9.0	13.0
2	王丹	石河子大学生命科学学院	35	161	6.0	10.0
3	胡梦薇	石河子大学生命科学学院	10	10	2.0	2.0
4	许万云	石河子大学生命科学学院	9	13	2.0	3.0
5	汪文伦	石河子大学生命科学学院	12	17	2.0	3.0
6	严国	石河子大学生命科学学院	11	12	2.0	2.0
7	牟云	石河子大学生命科学学院	7	5	2.0	2.0
8	王会敏	石河子大学生命科学学院	8	7	2.0	2.0