甜菜DAMD-PCR体系的建立及优化

• 作者: 兴旺 吴则东 孙燕红 童乐怡 马龙彪
• 来源期刊: 中国农学通报
• 学科: 农学
• 关键词: 甜菜 DAMD 体系优化 指纹图谱 DNA
• 年，卷（期）: 2017,（23）
• 所属期刊栏目: 生物科学
• 页码范围: 6-9
• 页数: 4页
• 分类号: S566.3
• 语种: 中文

摘要

为了建立甜菜DAMD扩增体系,以期利用DAMD引物应用于甜菜品种指纹图谱的构建及分子标记辅助育种.本实验利用单因素变量的方法对甜菜DAMD体系进行优化.同时选用12个甜菜品种,利用优化的体系对25条DAMD引物进行扩增.获得甜菜的最适DAMD体系:总体积为20μL,包含模板DNA 10～80 ng、0.75 U的DNA聚合酶、0.2 μL的dNTPs (2.5 mmol/L each)以及2.0 μL的引物(10 μmol/L).同时25条引物均扩增出了清晰条带,除了个别引物多态性较差外,其余引物多态性都非常的丰富,其中引物62H(-)就可以把实验中用到的12个甜菜品种全部区分开.由此可见,DAMD引物的扩增效率很高,并且扩增结果稳定,条带清晰,非常适合甜菜品种指纹图谱的构建及遗传多样性分析.