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摘要:
制备弧菌外膜蛋白K (outer membrane protein K,OmpK)单克隆抗体并对其特性进行研究.以原核表达系统表达野生株Vibrio parahaemolyticusB的OmpK免疫Balb/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞与肿瘤细胞SP2/0进行细胞融合,采用有限稀释法和间接酶联免疫吸附测定法筛选出能够稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株,小鼠体内诱导制备腹水,用饱和硫酸铵沉淀法和亲和层析柱纯化抗体.最终获得能稳定分泌抗OmpK的两株单克隆抗体杂交瘤细胞株OmpK-Mab-4B7、OmpK-Mab-3C5,2株杂交瘤细胞系所分泌的Mab亚类均为IgG1,效价达1:128 000,抗体3C5、4B7的敏感度IC5o分别为2.5、5.0 μg/mL.Western blotting结果显示单克隆抗体可以与本实验室12株副溶血性弧菌(V.parahaemolyticus A、B、C、D、E、F、G、H、I、J、ATCC17802、ATCC33847)的外膜蛋白有不同程度的结合反应,与4株溶藻弧菌中的3株(V.alginolyticusA、B、C)外膜蛋白能够较好的结合,与1株鳗弧菌(V.anguillarum MVM)外膜蛋白也有轻微的结合反应,实验制备的单克隆抗体可用于弧菌OmpK的基础研究和快速检测.
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文献信息
篇名 弧菌外膜蛋白OmpK单克隆抗体的制备及其特性
来源期刊 食品科学 学科 工学
关键词 弧菌 弧菌外膜蛋白K 单克隆抗体
年,卷(期) 2017,(6) 所属期刊栏目 生物工程
研究方向 页码范围 111-116
页数 6页 分类号 TS207.4
字数 4351字 语种 中文
DOI 10.7506/spkx1002-6630-201706017
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食品科学
半月刊
1002-6630
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大16开
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1980
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