N-糖基化修饰对极端嗜热酸性α-淀粉酶ApkA酶学性质的影响

• 作者: 曾静 袁林 郭建军
• 来源期刊: 食品科学
• 学科: 生物学
• 关键词: 极端嗜热酸性α-淀粉酶 毕赤酵母GS115 N-糖基化修饰 分泌表达
• 年，卷（期）: 2017,（6）
• 所属期刊栏目: 生物工程
• 页码范围: 48-54
• 页数: 7页
• 分类号: Q814
• 字数: 6381字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7506/spkx1002-6630-201706008

摘要

为探索N-糖基化修饰对极端嗜热酸性α-淀粉酶ApkA酶学性质的影响,同时为构建酵母工程菌奠定基础,将ApkA缺失信号肽突变体ApkAds及含有2个潜在Ⅳ-糖基化修饰位点的突变体ApkAdsD182N/G373S在毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115中进行表达.ApkAds和ApkAdsD 182N/G373S在Pichia pastoris GS115中大量表达并分泌到胞外,ApkAds的表观分子质量约为45 kD,ApkAdsD182N/G373S的表观分子质量约为55 kD.酶学性质分析表明,-ApkAds相比,ApkAdsD 182N/G373S的酶学性质发生了一定的变化.其最适反应pH值由6.5降低至5.5～6.0,酸性条件下稳定性增强;最适反应温度由90℃提高至100℃;于90℃的半衰期由5h增加至5.5h,于100℃保温10 min后的相对酶活力由32.03％增加至49.04％.结果表明N-糖基化修饰可适当提高ApkA的酸性条件下酶活力和稳定性、最适反应温度、热稳定性.突变体ApkAdsD182N/G373S的酶学性质使其适于淀粉液化工艺的应用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郭建军	江西省科学院微生物研究所	51	113	5.0	8.0
2	袁林	江西省科学院微生物研究所	36	59	4.0	5.0
3	曾静	江西省科学院微生物研究所	28	46	3.0	5.0