瘤胃中干酪乳杆菌的亚油酸异构酶基因的克隆与表达

• 作者: 付金衡 刘晓华 张凯强 李响敏 李慧美 李欣 李海星 柯颖笑
• 来源期刊: 食品科学
• 学科: 工学
• 关键词: 共轭亚油酸 亚油酸异构酶 干酪乳杆菌 克隆 表达
• 年，卷（期）: 2017,（6）
• 所属期刊栏目: 生物工程
• 页码范围: 1-5
• 页数: 5页
• 分类号: TS201.2
• 字数: 2584字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7506/spkx1002-6630-201706001

摘要

以从黄牛瘤胃中分离到的一株具有将亚油酸转化为c9,t11-共轭亚油酸(conjugated linoleic acid,CLA)的干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)Fx为出发菌株,提取其基因组DNA,聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)扩增得到1 700 bp大小的亚油酸异构酶(linoleic acid isomerase,LAI)基因片段,将该基因片段纯化后进行TA克隆,得到重组质粒pUCm-T-LAI,将重组质粒pUCm-T-LA琊表达质粒pET-DsbA同时进行双酶切,连接得到重组表达载体pET-DsbA-LAI,经PCR鉴定和酶切后,将重组表达载体转化到大肠杆菌BL21中,得到具有LAI 活性的重组菌株,能将亚油酸转化为c9,t11-CLA,表明从Lactobacillus casei Fx成功克隆LAI,该研究将有助于深入了解不同瘤胃细菌特异性合成不同CLA异构体的LAI基因差异.