细颗粒物加剧慢性阻塞性肺疾病小鼠肺泡巨噬细胞吞噬功能缺陷的PI3Kδ-RhoA细胞骨架机制

• 作者: 刘晓菊 包海荣 夏强 曾晓丽 胡淑婷
• 来源期刊: 中华医学杂志
• 关键词: 肺疾病,慢性阻塞性 颗粒物 巨噬细胞,肺泡 细胞骨架 小鼠
• 年，卷（期）: 2017,（24）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1893-1898
• 页数: 6页
• 字数: 4691字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0376-2491.2017.24.011

摘要

目的 探讨细颗粒物(PM2.5)加剧慢性阻塞性肺疾病(简称慢阻肺)小鼠肺泡巨噬细胞(AM)吞噬功能缺陷的磷脂酰肌醇3-激酶δ(PI3 Kδ)-Ras同源基因家族成员A(RhoA)细胞骨架机制.方法 40只小鼠按随机数字表法分为健康对照组、慢阻肺组、健康PM2.5组、慢阻肺PM2.5组各10只.采用香烟烟雾暴露法建立慢阻肺小鼠模型,健康PM2.5组及慢阻肺PM2.5组小鼠连续雾化吸入PM2.5(588 μg/m3)90 d.不连续密度梯度离心法分离AM;流式细胞术检测AM吞噬异硫氰酸荧光素标记大肠杆菌(FITC-E.coli)能力,用平均荧光强度(MFI)和吞噬阳性细胞百分比(吞噬％)表示;实时荧光定量PCR和Western印迹法检测AM mRNA和蛋白的表达;小G蛋白活性检测试剂盒检测RhoA活性;激光共聚焦显微镜观察AM细胞骨架.结果 慢阻肺组和健康PM2.5组MFI和吞噬％[4 512 ±517、(32.19 ±4.57)％和7 631±585、(50.78±4.58)％]均显著低于健康对照组[9 857±1 042、(68.53±2.88)％],且慢阻肺PM2.5组[3 121 ±393、(21.90±2.58)％]均显著低于慢阻肺组(均P＜0.01).慢阻肺组和健康PM2.5组PI3K8 mRNA、蛋白表达(3.41±0.54、0.84±0.08和1.52±0.35、0.71 ±0.11)均显著高于健康对照组(1.00±0.00、0.57 ±0.07)(均P＜0.05),且慢阻肺PM2.5组(5.53 ±0.42、1.17 ±0.25)均显著高于慢阻肺组(均P＜0.01).慢阻肺组和健康PM2.5组RhoA mRNA、蛋白表达及活性(0.70±0.07、0.41 ±0.10、0.70±0.06和0.84±0.06、0.46±0.11、0.87 ±0.07)均显著低于健康对照组(1.00±0.00、0.56±0.09、1.19±0.09)(均P＜0.05),且慢阻肺PM2.5组(0.42 ±0.05、0.31 ±0.06、0.44±0.04)均低于慢阻肺组(均P＜0.01).AM细胞骨架:健康对照组伪足伸出长而密集,细胞可见明显膜皱褶;慢阻肺组和健康PM2.5组伪足伸出短且稀疏,细胞轻微变形;慢阻肺PM2.5组伪足伸出障碍,细胞形态僵硬,吞噬FITC-E.coli能力明显受损.基础状态及PM2.5干预后,PI3K8 mRNA、蛋白表达与RhoA mRNA、蛋白表达及活性均呈负相关(均P＜0.01),PI3Kδ mRNA、蛋白表达与MFI均呈负相关(均P＜0.05),RhoA mRNA、蛋白表达及活性均与MFI均呈正相关(均P＜0.05).结论 PM2.5过度活化PI3K8,抑制RhoA活性致细胞骨架异常重排加剧慢阻肺小鼠AM吞噬功能缺陷.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘晓菊	兰州大学第一医院老年呼吸科	54	524	13.0	20.0
2	包海荣	兰州大学第一医院老年呼吸科	43	390	11.0	17.0
3	曾晓丽	兰州大学第一医院老年呼吸科	29	296	11.0	16.0
4	夏强	兰州大学第一医院老年呼吸科	2	14	2.0	2.0
5	胡淑婷	兰州大学第一医院老年呼吸科	2	14	2.0	2.0