稳定表达人BACE1启动子及荧光素酶报告基因HEK293细胞株的建立

• 作者: 朱炳林 罗伟 邓常青 陈国俊 龙艳
• 来源期刊: 重庆医学
• 学科: 生物学
• 关键词: β位点裂解酶-1 核心启动子 荧光素酶报告载体 高通量药物筛选
• 年，卷（期）: 2017,（3）
• 所属期刊栏目: 论著·基础研究
• 页码范围: 302-304
• 页数: 3页
• 分类号: Q291
• 字数: 2901字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-8348.2017.03.005

摘要

目的 对人β位点裂解酶-1(BACE1)基因核心启动子进行克隆,构建携带BACEI基因启动子的荧光素酶报告载体,筛选稳定表达细胞株并分析其转录活性.方法 提取人胚肾HEK293细胞基因组DNA,以其为模板,PCR扩增BACE1核心启动子(-691～+67)并克隆至荧光素酶报告载体pGL4.21中,构建BACE1基因启动子荧光素酶报告载体pGL4.21-BACE1,将其转染HEK293细胞(无启动子的pGL4.21载体作阴性对照),利用嘌呤霉素筛选稳定表达株后检测其转录活性.结果 成功扩增到758 bp的BACE1核心启动子,pGL4.21-BACE1载体经双酶切鉴定正确;HEK293细胞被该载体转染后经嘌呤霉素筛选得到6株稳定表达BACE1启动子的细胞株,其转录活性分别是对照组(HEK293/pGL4.21)的(134.7±22.3)、(634.0±13.9)、(437.6±6.1)、(805.5±5.5)、(492.8±59.1)、(1 021.1±46.6)倍(P=0.001).结论 成功构建了人BACE1基因启动子荧光素酶报告载体.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	罗伟	重庆医科大学附属第一医院神经病学重点实验室	19	25	3.0	5.0
2	陈国俊	重庆医科大学附属第一医院神经病学重点实验室	6	23	3.0	4.0
3	朱炳林	重庆医科大学附属第一医院神经病学重点实验室	2	0	0.0	0.0
4	邓常青	重庆医科大学附属第一医院神经病学重点实验室	1	0	0.0	0.0
8	龙艳	重庆医科大学附属第一医院神经病学重点实验室	1	0	0.0	0.0