一株石油烃降解菌TY22烷烃羟化酶基因的克隆及功能研究

• 作者: 余小丽 冀黎骏 唐赟 敬珊 杨雪 邹书珍
• 来源期刊: 安徽农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 石油烃降解菌 烷烃羟化酶 表达 功能
• 年，卷（期）: 2017,（36）
• 所属期刊栏目: 生物技术
• 页码范围: 131-134,153
• 页数: 5页
• 分类号: S188
• 字数: 4554字
• 语种: 中文

摘要

[目的]对一株石油烃降解菌TY22的烷烃羟化酶基因alkB克隆测序,并对其外源表达和功能进行研究.[方法]PCR扩增获得alkB基因部分序列,再根据该序列通过染色体步移技术,最终获得完整CDS序列.将alkB基因与pET21b(+)载体构建重组质粒,并转入E.coli BL21(DE3)进行表达.再将alkB基因克隆至pCom8载体中,分别转入E.coli GEc137(pGEc47△B)和Pseudomonas fluorescens KOB2Δ1进行基因功能的互补试验.[结果]染色体步移获得了1236 bp的烷烃羟化酶基因完整CDS序列(GenBank Accession:KU867870).诱导表达发现,重组菌在0.1 mmol/L IPTG、30℃条件下诱导培养6 h的表达效果最佳,得到与预期相符的46 kDa蛋白.基因功能互补试验发现,重组菌能在以C12～C16为唯一碳源的培养基中生长.[结论]TY22菌株的烷烃羟化酶基因完整CDS序列全长1236 bp,能氧化C12～C16的中长链烷烃,并能在大肠杆菌中有效表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	唐赟	西华师范大学生命科学学院	21	135	7.0	11.0
2	余小丽	西华师范大学生命科学学院	3	0	0.0	0.0
3	杨雪	西华师范大学生命科学学院	10	7	2.0	2.0
4	邹书珍	西华师范大学生命科学学院	7	7	1.0	2.0
5	冀黎骏	西华师范大学生命科学学院	3	0	0.0	0.0
6	敬珊	西华师范大学生命科学学院	2	1	1.0	1.0