人骨形态发生蛋白-9基因修饰SD大鼠骨髓间充质干细胞的建立研究

• 作者: 向晓波 周艳萌 蒋练
• 来源期刊: 现代医药卫生
• 关键词: 骨髓 间质干细胞 转染 大鼠,Sprague-Dawley 骨形态发生蛋白质类 基因
• 年，卷（期）: 2017,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 801-804
• 页数: 4页
• 字数: 3468字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-5519.2017.06.003

摘要

目的 建立人骨形态发生蛋白-9(BMP-9)基因转染SD大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs),并观察其在细胞内的表达.方法 采用全骨髓细胞贴壁法分离出BMSCs,利用流式细胞仪检测CD44、CD90、CD45、CD34细胞表面标记物;通过脂质体转染法将pDoubleEx-EGFP-BMP-9质粒、pDoubleEx-EGFP质粒转染入SD大鼠BMSCs,利用荧光显微镜、荧光定量PCR及蛋白质印迹法检测BMP-9的转染效果.结果 全骨髓贴壁培养法成功分离大鼠BMSCs,传代培养至第3代可获得较高纯度,CD44-FITC的阳性表达率为92.35%,CD90-FITC的阳性表达率为91.76%,CD34-PE的阳性表达率为2.68%,CD45-PE的阳性表达率为4.13%;荧光显微镜和倒置显微镜下观察,BMP-9基因修饰后细胞形态未发生变化;PCR检测发现pDoubleEx-EGFP-BMP-9转染组中大量表达BMP-9基因,是pDoubleEx-EGFP组的378517.88倍;Western blotting结果 显示,pDoubleEx-EGFP-BMP-9组中大量表达BMP-9蛋白,pDoubleEx-EGFP未见表达.结论 全骨髓贴壁培养法可以成功分离BMSCs,BMP-9基因可以通过脂质体转染的方法 转染入SD大鼠的BMSCs中并得到成功表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周艳萌	遵义医学院微生物与免疫学实验室	33	111	6.0	8.0
2	向晓波	遵义医学院附属口腔医院口腔外科	20	70	6.0	7.0
3	蒋练	遵义医学院附属口腔医院口腔外科	29	122	6.0	10.0