云南莴笋尖酪氨酸酶分离纯化及酶学性质

• 作者: 唐云明 唐菁 廖海君 李蕊伽 白亚娟 陶敏
• 来源期刊: 食品科学
• 学科: 生物学
• 关键词: 云南莴笋尖 酪氨酸酶 分离纯化 酶学性质
• 年，卷（期）: 2017,（8）
• 所属期刊栏目: 生物工程
• 页码范围: 30-36
• 页数: 7页
• 分类号: Q946.5
• 字数: 5338字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7506/spkx1002-6630-201708006

摘要

为获得更多成本廉价且易得的酪氨酸酶来源,为云南莴笋尖酪氨酸酶抑制剂的研究提供参考,选取云南莴笋尖为实验材料,通过匀浆、缓冲液抽提、硫酸铵分级沉淀、DEAE-Sepharose离子交换层析和Superdex-200凝胶过滤层析等方法纯化,获得电泳纯的酪氨酸酶,并对纯化后的酪氨酸酶进行部分酶学性质研究.结果表明,云南莴笋尖中酪氨酸酶的比活力为20.62 U/mg,分子质量约为995.40 kD,亚基分子质量约为65.23 kD.最适反应温度和最适反应pH值分别为60℃和8.0,在pH 6.0～8.0及20～40℃范围内较稳定.最适条件下,以左旋多巴为底物的Km值为1.567 mmol/L,vmax为0.037 6 μmol/ (min·L).乙醇、异丙醇、正丁醇对该酶活性有不同程度的抑制作用;甲醇、Co2+、Mn2+、pb2+、Ag+、Cd2+、Ba2+、Ca2+对该酶活性有不同程度的激活作用,Co2+、Mn2+对该酶具有显著的激活作用,低浓度的Zn2+、Cu2+、草酸、抗坏血酸对该酶有激活作用,高浓度时有抑制作用.尿素、EDTA、Li+、K+、Mg2+对该酶活性影响较小.