鲜切荸荠类黄酮3'-羟化酶分离纯化及其动力学性质

• 作者: 何凤平 张伟敏 潘永贵
• 来源期刊: 食品科学
• 学科: 工学
• 关键词: 鲜切荸荠 类黄酮3'-羟化酶 分离纯化 动力学性质
• 年，卷（期）: 2017,（8）
• 所属期刊栏目: 生物工程
• 页码范围: 17-23
• 页数: 7页
• 分类号: TSS255.1
• 字数: 6590字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7506/spkx1002-6630-201708004

摘要

以鲜切荸荠为材料,通过pH 7.5 Tris-HC1缓冲液浸提得到类黄酮3'-羟化酶(flavonoid 3'-hydroxylase,F3'H)粗酶液,然后采用硫酸铵分级沉淀、透析、二乙氨乙基(dicthylaminoethyl,DEAE)-纤维素离子交换层析及Sephadex G-100凝胶过滤层析进行分离纯化,最终所得纯化酶的纯化倍数达到14.01,比活力提高到478.49 U/mg,回收率为6.38％.通过十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamidegel electrophoresis,SDS-PAGE)进行纯度鉴定,已达到电泳纯,测定得到其分子质量约为53.09 kD.纯化酶FYH的最适温度为30℃,最适pH值为7.5;以柚皮素作为底物,测得该酶的米氏常数(Km)为1.08 mmol/L,最大反应速率(vmax)为416.67 U/ (min·mL);对于酶活性,高浓度的Na+表现出微弱的抑制作用,Ca2+和柠檬酸具有强烈的抑制作用,而Fe2+、Mg2+、NADPH和VC却表现出强烈的激活作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张伟敏	海南大学食品学院	48	301	8.0	15.0
2	潘永贵	海南大学食品学院	41	225	8.0	12.0
3	何凤平	海南大学食品学院	5	26	4.0	5.0