荧光定量PCR检测恶性转化人脐带间充质干细胞中DNA甲基化转移酶的改变

• 作者: 唐秋灵 李伟中 赖秀蓝 邱晓燕 郑泽鑫 陈业增 陈秋蓉
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 干细胞 脐带脐血干细胞 人脐带间充质干细胞 恶性转化 DNA甲基化 DNA甲基化转移酶
• 年，卷（期）: 2017,（21）
• 所属期刊栏目: 脐带脐血干细胞
• 页码范围: 3320-3325
• 页数: 6页
• 分类号: R394.2
• 字数: 6335字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2017.21.007

摘要

背景:根据体外培养的成体干细胞自发恶性转化现象及肿瘤干细胞理论,人脐带间充质干细胞在体外培养过程中可能产生变异,体内移植后可能存在致瘤性风险.因此,建立健全的体外安全性检测程序,将在干细胞临床应用上起积极推动作用.目的:探讨人脐带间充质干细胞致瘤性机制及DNA甲基化转移酶的表达水平.方法:采用组织块贴壁法分离、培养、扩增出人脐带间充质干细胞,利用3-甲基胆蒽促使人脐带间充质干细胞发生恶性转化,通过形态学观察,裸鼠成瘤实验进行验证,成瘤组织进行病理学鉴定、原代细胞培养,荧光定量PCR检测人脐带间充质干细胞与肿瘤细胞DNA甲基化转移酶表达水平的差异.结果与结论:①人脐带间充质干细胞经3-甲基胆蒽处理后形成恶性转化细胞,呈恶性生长,细胞核型呈非整数倍体改变,注入裸鼠体内后能形成恶性肿物;②经荧光定量PCR检测,恶性转化后肿瘤细胞(实验组)相比二甲基亚砜培养人脐带间充质干细胞(对照组),其DNA甲基化转移酶的基因表达量明显增高;③结果表明,人脐带间充质干细胞在一定条件下能发生恶性转化,包括形态学变化及表观遗传学层面改变,DNA甲基化转移酶可作为预防干细胞移植后成瘤的进一步研究方向.