利用颗粒细胞筛选绵羊VEGFR有效干扰片段的研究

• 作者: 周平 张国华 徐红伟 曹忻 杨具田 石国庆 邹云龙 阿依木古丽
• 来源期刊: 黑龙江畜牧兽医（上半月）
• 学科: 农学
• 关键词: 血管内皮生长因子(VEGF) 血管内皮生长因子受体(VEGFR) RNA干涉 颗粒细胞 绵羊
• 年，卷（期）: 2017,（7）
• 所属期刊栏目: 试验研究
• 页码范围: 10-15,291
• 页数: 7页
• 分类号: S826.2|Q78
• 语种: 中文

摘要

为了进一步探究血管内皮生长因子(VEGF)对绵羊卵母细胞成熟和胚胎发育的作用,试验采用电穿孔技术(Electroporation)将针对血管内皮生长因子受体(VEGFR)中的两个受体FLT1和KDR/FLK-1设计的6条双链小RNA导入到绵羊颗粒细胞内,通过实时定量PCR检测FLT1和KDR/FLK-1表达量的变化,筛选出针对VEGFR的有效干扰片段.结果表明:试验组F2(FLT1-siRNA-2)第1～3天的FLT1 mRNA相对表达量分别为7.17×10-6±4.97×10-8、5.92×10-6±4.73×10-8和1.14×10-5±2.84×10-,极显著低于其他FLT1试验组(P＜0.01),且FLT1 mRNA相对表达量相差100倍或10倍;试验组K1(KDR/FLK-1-siRNA-1)第1～3天KDR/FLK-1 mRNA相对表达量分别为1.46×10-7±6.08×10-9、2.80 × 10-7±1.82×10-8和7.99×10-7±2.60×10-8,极显著低于其他KDR/FLK-1试验组(P＜0.01),且KDR/FLK-1 mRNA相对表达量相差100倍或10倍.从第4天开始试验组F2 FLT1 mRNA相对表达量和试验组K1 KDR/FLK-1 mRNA相对表达量逐渐增加,到达第9天与其他组趋于相近.最终确定针对FLT1和KDR/FLK-1最有效的干扰片段分别是FLT1-siRNA-2扣KDR/FLK-1-siRNA-1.