引物标记技术在耐甲氧西林金黄色葡萄球菌检测中的应用

• 作者: 吴润香 梁有才 聂署萍 范菲楠 陆学东
• 来源期刊: 检验医学与临床
• 关键词: 标记 特异引物 GeXP系统 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌
• 年，卷（期）: 2017,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 624-626,629
• 页数: 4页
• 字数: 3462字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-9455.2017.05.010

摘要

目的 在GeXP系统中应用CY5标记的特异引物代替通用引物,建立一种检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(M R-SA)的方法.方法 设计mecA与nuc基因引物,经聚合酶链反应(PCR)扩增琼脂糖电泳验证引物特异性并优化PCR反应条件.用荧光染料CY5标记单条引物(单独标记上游或下游引物).以提取的MRSA、甲氧西林耐药凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)、甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)核酸为模板液,采用已标记引物进行单重及多重PCR,产物经琼脂糖电泳与GeXP毛细管电泳分析,验证应用效果.再通过采用混合标记引物的GeXP系统检测100株M RSA,分析其应用效果.结果 单标记下游引物的GeXP-PCR的杂质扩增峰较少.经GeXP系统检测分析的MRSA、MRCNS、MSSA均出现目的特征峰,能明确辨别其含有大小不同的基因片段,结果与琼脂糖电泳一致;经GeXP系统分析的100株MRSA均含有nuc与mecA片段,与VITEKⅡCompact检测结果相符.结论 单独标记下游引物应用于GeXP检测M RSA的方法可行.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	聂署萍	中山大学附属第八医院检验医学部	6	9	2.0	2.0
2	范菲楠	中山大学附属第八医院检验医学部	7	8	2.0	2.0
3	陆学东	中山大学附属第八医院检验医学部	14	28	3.0	4.0
4	梁有才	广东医科大学研究生学院	6	8	2.0	2.0
5	吴润香	中山大学附属第八医院检验医学部	2	4	2.0	2.0