肿瘤细胞外泌体中融合基因的检测

• 作者: 吴晓洁 孙兆增 崔琮 殷慧慧 法云智 王友亮 胡显文 谭招丽 邵勇 郗永义 高丽华
• 来源期刊: 现代生物医学进展
• 学科: 医学
• 关键词: 外泌体 EML4-ALK 基因融合 mRNA
• 年，卷（期）: 2017,（17）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 3201-3205
• 页数: 5页
• 分类号: R-33|R730.231
• 语种: 中文
• DOI: 10.13241/j.cnki.pmb.2017.17.001

摘要

目的:探究肿瘤细胞分泌的外泌体中是否可以检测到来源于源细胞的融合基因mRNA.方法:培养人非小细胞肺癌NCI-H3122细胞,采用外泌体试剂盒提取细胞上清中的外泌体,并用Western Blot实验验证外泌体是否提取成功.分别提取外泌体以及H3122细胞中的总RNA,将RNA反转录为cDNA,通过PCR反应扩增v1型EML4-ALK融合基因片段,经琼脂糖凝胶电泳确定目的条带后,将两种PCR产物送公司进行基因测序,最后对测序结果进行比对分析.结果:从H3122细胞上清中成功提取了外泌体,并且在外泌体中检测到来源于H3122细胞的mRNA;从H3122细胞外泌体中检测到EML4-ALK融合基因,并发现外泌体中的EML4-ALK融合基因的融合形式为V1,与在H3122细胞中检测到的EML4-ALK融合基因的融合形式完全相同.结论:肿瘤细胞分泌的外泌体中可以检测到肿瘤细胞来源的mRNA,并且外泌体中的mRNA可以反映肿瘤细胞mRNA的基因融合情况等生物学特性.