TaqMan定量PCR检测水稻中外源基因含量

• 作者: 史庆玲 徐立新 肖琳琳 闫瑾
• 来源期刊: 安徽农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: TaqMan定量PCR 转基因 水稻 拷贝数
• 年，卷（期）: 2017,（23）
• 所属期刊栏目: 生物技术
• 页码范围: 123-124
• 页数: 2页
• 分类号: S188
• 字数: 2179字
• 语种: 中文

摘要

[目的]采用TaqMan定量PCR技术检测水稻中外源基因含量.[方法]采用TaqMan定量PCR技术以编码磷脂晦D基因PLD为内标准基因,检测转基因水稻中外源TT51-1的含量.利用DNA梯度稀释法分别求内标准基因PLD和TT51-1的Ct值与拷贝数对数值的标准曲线方程,并将得到的Ct值代入标准曲线方程求取样品中外源基因的拷贝数.[结果]内标准基因PLD标准曲线方程为y=-3.403x+ 39.939,R2 =0.993;TT51-1基因标准曲线方程为y=-3.35x+ 37.37,R2 =0.991,转基因含量为1.21％,不确定度为0.45.[结论] TaqMan定量PCR技术可以用于确定转基因作物外源基因含量.