山羊化脓隐秘杆菌重庆分离株CbpA肝素结合结构域鉴定

• 作者: 付利芝 张素辉 徐登峰 杨睿 沈克飞 胡瑞思 许国洋
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 化脓隐秘杆菌 CbpA 黏附 肝素 肝素结合结构域
• 年，卷（期）: 2018,（1）
• 所属期刊栏目: 预防兽医
• 页码范围: 173-180
• 页数: 8页
• 分类号: S852.61
• 字数: 4667字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11843/j.issn.0366-6964.2018.01.020

摘要

本研究旨在对山羊化脓隐秘杆菌重庆分离株的胶原结合蛋白(collagen-binding protein,Cbp)CbpA(CbpA-CQ)进行序列分析,鉴定其中2个潜在的肝素结合结构域NRB和B1.运用生物信息学软件分析CbpA-CQ基因及其编码产物.采用PCR扩增NRB和B1基因,将其克隆至原核表达载体pGEX-4T-1.融合蛋白GST-NRB和GST-B1在大肠杆菌DE3菌株中被诱导表达,使用Gluthathione-Sepharose 4B纯化.采用免疫印迹检测融合蛋白GST-NRB、GST B1与HeLa细胞的黏附情况,以及肝素对融合蛋白黏附细胞的抑制情况.结果显示,重庆株CbpA有7个胶原结合蛋白B结构域,约占全长的55％,此结构域与化脓隐秘杆菌、链球菌属等细菌有同源性.重庆株CbpA与化脓隐秘杆菌的CbpA在进化树中聚集成一个进化支.从诱导菌裂解物上清中亲和纯化得到融合蛋白GST-NRB和GST-B1.GST-NRB、GST-B1呈剂量依赖性黏附HeLa细胞,肝素呈剂量依赖性抑制GST-NRB、GST-B1黏附HeLa细胞.结果表明尽管CbpA-CQ有很大变异性,但具有已知化脓隐秘杆菌CbpA的共同序列特征;其NRB和B1区域为肝素结合结构域.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张素辉		58	179	8.0	10.0
2	付利芝		87	268	9.0	12.0
3	徐登峰		67	296	10.0	14.0
4	沈克飞		55	172	7.0	10.0
5	杨睿		45	127	7.0	10.0
6	许国洋		28	39	4.0	5.0
7	胡瑞思	西北农林科技大学动物医学院	3	6	1.0	2.0