单增李斯特菌CdaA的抗原表位分析及抗体的制备

• 作者: 丁承超 刘箐 孙静娟 曾海娟 李杰 王广彬 王淑娟 邱景璇
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: 单增李斯特菌 cdaA 生物信息学 抗原表位 单克隆抗体
• 年，卷（期）: 2018,（5）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 163-171
• 页数: 9页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2017-0823

摘要

生物信息学分析结果显示单增李斯特菌腺苷酸环化酶CdaA具有良好的种内保守性、种间特异性和抗原表位结构,本研究对该蛋白的免疫原性进行验证并制备单克隆抗体,拟以CdaA为检测靶标检测单增李斯特菌.考虑到跨膜区可能会阻碍CdaA的表达,因而构建pET30a-Δ300cdaA并诱导表达Δ100CdaA.以纯化的Δ100CdaA制备的多克隆抗体效价可达1:128000.Western-blotting分析表明多抗能够识别从单增李斯特菌中提取的CdaA.另外,筛选得到一株单克隆抗体,3F8,单抗效价可达1:512000.Western blotting分析可知该单抗能够与9株单增李斯特菌和2株非致病李斯特菌的提取蛋白结合,并且与大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌等7株其他菌种的提取蛋白不结合,表明该单抗具有良好的特异性.利用生物信息学筛选检测靶标并分析抗原表位结构,最后成功制备多克隆抗体和单克隆抗体.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘箐	上海理工大学医疗器械与食品学院	64	204	7.0	11.0
2	王广彬		12	35	4.0	5.0
3	曾海娟	上海理工大学医疗器械与食品学院	14	40	4.0	5.0
4	李杰	上海理工大学医疗器械与食品学院	17	44	4.0	6.0
5	丁承超	上海理工大学医疗器械与食品学院	23	62	5.0	6.0
6	王淑娟	上海理工大学医疗器械与食品学院	8	16	3.0	3.0
7	孙静娟	上海理工大学医疗器械与食品学院	4	10	2.0	3.0
8	邱景璇	上海理工大学医疗器械与食品学院	3	4	1.0	2.0