鸭甲型肝炎病毒-Ⅰ型3D基因在昆虫细胞中的表达及抗原检测

• 作者: 吴植 夏文龙 朱善元 王安平 顾玲玲
• 来源期刊: 扬州大学学报（农业与生命科学版）
• 学科: 农学
• 关键词: 鸭甲型肝炎病毒-Ⅰ型 3D基因 昆虫细胞 表达
• 年，卷（期）: 2018,（1）
• 页码范围: 16-19,24
• 页数: 5页
• 分类号: S852.65
• 语种: 中文
• DOI: 10.16872/j.cnki.1671-4652.2018.01.004

摘要

通过高保真PCR方法扩增出鸭甲型肝炎病毒-Ⅰ型(DHAV-Ⅰ)RNA依赖的RNA聚合酶3D基因,克隆至杆状病毒表达载体pFastBac1中,构建重组杆状病毒转移载体pFB-3D,将其转化感受态细胞DH10Bac,获得重组杆粒rBacmid-3D,转染昆虫细胞Sf9,收获重组杆状病毒rBac-3D,通过间接免疫荧光、Western blot对重组蛋白的表达水平进行检测.结果表明:间接免疫荧光数据显示表达的重组蛋白能与鸭抗全病毒阳性血清发生特异性结合,Westernblot表达的重组蛋白分子量约为51 ku,与理论值相符.这一研究说明3D蛋白在昆虫细胞中获得成功表达,为DHAV-Ⅰ型ELISA检测试剂盒的研制提供了技术基础.