抗病毒蛋白Viperin抑制猪瘟病毒在PK-15细胞上的复制

• 作者: 张纹纹 李基棕 李文良 杨蕾蕾 毛立 江杰元 邓加武 郝飞
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: Viperin 猪瘟病毒 抗病毒 共定位 相互作用
• 年，卷（期）: 2018,（1）
• 所属期刊栏目: 预防兽医
• 页码范围: 139-146
• 页数: 8页
• 分类号: S852.651
• 字数: 3964字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11843/j.issn.0366-6964.2018.01.016

摘要

Viperin是一种抗病毒蛋白,具有广谱的抗病毒功能.为了研究猪源抗病毒蛋白Viperin对猪瘟病毒(CSFV)的抗病毒作用及机制,通过构建细胞系过表达或通过siRNA转染抑制Viperin表达,采用荧光定量RT-PCR和病毒滴度测定检测CSFV增殖水平的变化;检测培养上清和细胞中病毒含量的变化趋势,评价其对病毒释放的影响;进而通过共聚焦试验和免疫共沉淀(co-immunoprecipitation,Co-IP)试验检测Viperin与病毒E2蛋白的共定位与相互作用.与对照细胞相比,过表达Viperin蛋白可以显著抑制CSFV在PK-15细胞上的复制,在感染后24、48、72 h,病毒基因水平和病毒滴度分别下降68.75％、83.61％、77.27％和68.75％、87.5％、80.39％.通过RNA干扰技术抑制Viperin在PK-Vi细胞中的表达后CSFV复制显著恢复(仍低于对照组).培养上清和细胞中病毒含量均同等程度受到抑制,表明Viperin表达对病毒的释放没有影响.共聚焦试验证明Viperin蛋白与E2蛋白在细胞内存在共定位现象.免疫共沉淀试验证明Viperin蛋白与E2蛋白存在相互作用.该研究证实Viperin具有抗CSFV作用,该作用可能是通过与病毒E2蛋白相互作用实现的,这为CSFV与宿主免疫反应相互作用研究提供了理论基础.