核桃JrGRAS2基因响应热胁迫的表达及功能分析

• 作者: 张芳芳 李孝哲 杨桂燕 粟莉圆 赵婷婷 陈淑雯
• 来源期刊: 植物研究
• 学科: 生物学
• 关键词: 核桃 热胁迫 GRAS转录因子 表达分析 酵母表达系统
• 年，卷（期）: 2018,（1）
• 页码范围: 125-131
• 页数: 7页
• 分类号: Q943.2
• 字数: 3935字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7525/j.issn.1673-5102.2018.01.015

摘要

GRAS转录因子在植物响应逆境中起重要作用.为更好的了解核桃(Juglans regia)在逆境胁迫下的适应机制,本研究从‘香玲’核桃转录组中克隆获得一条GRAS基因(命名为JrGRAS2),对其在不同高温胁迫下的表达进行分析,并将该基因插入酵母表达载体pYES2中构建重组载体pYES2-JrGRAS2,将pYES2-JrGRAS2转入酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)INVSCI,同时以转化pYES2的重组酵母作为阴性对照,在酵母表达系统中研究该基因的抗热胁迫功能.结果显示,该基因开放读码框(ORF)全长1 296 bp,拟推导的蛋白分子量为47 405.83 Da,含有氨基酸数为431,理论等电点为5.66.在热胁迫下,JrGRAS2基因被显著诱导,特别是在36℃胁迫0.5h的茎内,其表达相对于对照被上调了335.5倍.对两种酵母进行热胁迫,发现转JrGRAS2基因酵母表现出较对照更高的生存活性.表明JrGRAS2基因具有响应热胁迫的能力,且能提高酵母的抗性,JrGRAS2基因可作为核桃逆境应答的重要候选基因.