莪术醇诱导胆管癌细胞凋亡和调控细胞周期的体外研究

• 作者: 周昕玥 唐增伟 孟文勃 张金铎 把永江 李汛 苏刚 赵盛 逯娅雯
• 来源期刊: 兰州大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 莪术醇 胆管癌 细胞周期 凋亡
• 年，卷（期）: 2018,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 65-70
• 页数: 6页
• 分类号: R285.5
• 字数: 4022字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13885/j.issn.1000-2812.2018.01.012

摘要

目的 通过体外实验观察莪术醇对人肝胆管癌RBE细胞的增殖、凋亡和细胞周期的影响,并探讨其分子机制.方法 体外培养RBE细胞,二甲氧唑黄(XTT)比色法检测不同浓度的莪术醇(12.5、25、50、75、100 μg/mL)在不同时间段(24、48、72 h)对RBE细胞增殖的抑制作用;多功能微孔板检测系统检测50、75、100 μg/mL莪术醇处理后RBE细胞Caspase-3/7酶活性;流式细胞术检测75、100 μg/mL莪术醇48 h作用后RBE细胞周期分布及凋亡率变化;蛋白免疫印迹法检测100 μg/mL莪术醇处理RBE细胞48 h后细胞周期蛋白D1、核因子-κB(NF-κB)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)蛋白的表达水平.结果 莪术醇能显著抑制RBE细胞的增殖并诱导其凋亡,在50-100 μg/mL范围内呈浓度和时间依赖性,100 μg/mL的莪术醇作用48 h其抑制率可达56％;莪术醇处理RBE细胞48 h后Caspase-3/7荧光强度增加,酶活性增强,并能诱导RBE细胞发生G1期阻滞,伴随细胞周期蛋白D1、NF-κB、Bcl-2蛋白表达水平降低.结论 莪术醇能通过抑制细胞周期蛋白D1使肝胆管癌RBE细胞阻滞在G1期,抑制其增殖并通过激活线粒体凋亡途径诱导其凋亡.