广西卵形鲳鲹小脑来源细胞系的建立及特征分析

• 作者: 余庆 李菲 牙韩争 董德信 覃仙玲 陈宪云
• 来源期刊: 广西科学
• 学科: 农学
• 关键词: 卵形鲳鲹 小脑来源细胞系 细胞特征 细胞霉性
• 年，卷（期）: 2018,（1）
• 所属期刊栏目: 实验研究类
• 页码范围: 74-79
• 页数: 6页
• 分类号: S917.4
• 字数: 4689字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13656/j.cnki.gxkx.20180206.001

摘要

[目的]卵形鲳够(Trachinotus ovatus)是广西重要的海水经济鱼类,但近年来随着养殖规模扩大,各种病害侵染引起的疾病频繁暴发,给广西卵形鲳鲹养殖产业造成重大损失.建立卵形鲳够小脑来源的细胞系(Cellline from cerebellum ofTrachinotus ovatus,TOCC),将有利于广西卵形鲳鲹养殖中病毒性病害的分离、鉴定和病害的侵染致病分子机理的研究,以及环境污染和变化的动态监测.[方法]采用胰蛋白酶消化法分离得到卵形鲳鲹小脑组织的原代细胞,并进行原代培养.待原代细胞铺满单层后进行传代培养.对稳定传代的TOCC进行18SrDNA基因测序分析,然后进行生长速率分析和染色体分析,并开展病原菌(溶藻弧菌Vibrioalginolyticus)胞外产物对TOCC的毒性分析.[结果]稳定传代的TOCC为成纤维样细胞,18S rDNA基因分析结果显示其来源于卵形鲳鲹;染色体核型分析发现TOCC具有二倍体特征,特征染色体数目为62条;不同培养条件下TOCC细胞的生长速率不同,28℃生长速度最快;病原菌胞外产物对TOCC具有明显的毒性.[结论]本研究成功建立广西卵形鲳鲹小脑组织来源的细胞系(TOCC).细菌胞外产物对TOCC细胞毒性结果表明,该细胞系在一定范围内能够替代活体检测,实现体外细胞水平对广西海水养殖中病害侵染和环境污染物的快速检测,为养殖病害的有效预防提供技术支持.