SREBP-1c基因过表达细胞模型的构建及对HepG2细胞脂滴含量的影响

• 作者: 刘芳 秦双红 赵燕霞
• 来源期刊: 癌变·畸变·突变
• 学科: 生物学
• 关键词: SREBP-1基因 慢病毒载体 人肝癌细胞HepG2 基因转染 脂滴
• 年，卷（期）: 2018,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 14-19
• 页数: 6页
• 分类号: Q291
• 字数: 4710字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-616x.2018.01.003

摘要

目的:构建SREBP-1c过表达HepG2细胞模型并观察其对脂滴含量的影响,为进一步深入研究肝癌脂滴代谢异常机制提供细胞模型.方法:采用DNA重组技术,将SREBP-1c基因克隆至慢病毒表达载体pLenti 6.3/V5中,并用脂质体介导法将慢病毒包装系统和带目的基因的质粒pLenti6.3-SREBP-1c共转染293T细胞,收集上清,感染HepG2细胞.通过Real-time PCR和Western blot对细胞株进行鉴定.采用免疫荧光检测HepG2细胞中脂滴的数量、大小及细胞内甘油三酯的含量.结果:成功构建了过表达SREBP-1c基因的慢病毒载体pLenti6.3-SREBP-1c,转染后HepG2细胞中可见明显的SREBP-1c蛋白表达.Real-time PCR检测结果显示转染SREB P-1c基因的HepG2细胞中SREBP-1c mRNA水平较对照组升高了约11.4倍.Western blot结果显示SREBP-1c蛋白水平较对照组提高3.2倍.免疫荧光显示过表达SREBP-1c能够明显增加HepG2细胞内脂滴的数量和大小.细胞内甘油三酯定量结果显示甘油三酯含量较对照组明显升高(P＜0.01).结论:成功构建了,REBP-1c基因过表达的重组慢病毒载体及其稳定转染细胞株.高表达SREBP-1c的HepG2细胞增加了细胞中脂滴的数量、大小和甘油三酯的含量,可用于从脂滴代谢方面对肝癌发病分子机制的研究.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘芳	第四军医大学西京医院皮肤科	45	258	9.0	13.0
5	秦双红		2	1	1.0	1.0
6	赵燕霞		1	1	1.0	1.0