集胞藻PCC6803乙醇酸脱氢酶基因的克隆及其叶绿体定位分析

• 作者: 侯典云 胥华伟
• 来源期刊: 核农学报
• 关键词: 光呼吸 集胞藻PCC6803 乙醇酸脱氢酶 叶绿体定位 瞬时表达
• 年，卷（期）: 2018,（7）
• 所属期刊栏目: 植物诱变育种·农业生物技术
• 页码范围: 1330-1337
• 页数: 8页
• 语种: 中文
• DOI: 10.11869/j.issn.100-8551.2018.07.1330

摘要

为明确集胞藻PCC6803乙醇酸脱氢酶与水稻Rubisco小亚基叶绿体转运肽(RCTP)的融合蛋白是否能准确定位到水稻叶绿体,本研究以特异引物从集胞藻PCC6803基因组DNA中扩增获得约1.5 kb的片段,将该片段与水稻Rubisco小亚基叶绿体转运肽连接,然后将融合片段连入瞬时表达载体P322-d1-eGFP,测序,获得融合基因RCTP-gdh,进一步构建了叶绿体定位的瞬时表达载体RCTP-GDH-eGFP-d1并进行了叶绿体定位研究.结果表明,集胞藻PCC6803 GDH共编码492个氨基酸,含有FAD结合域、FAD关联的氧化酶活性(222 ～464 aa)以及乙醇酸氧化酶亚基(51～463 aa).激光共聚焦显微镜分析表明,融合蛋白RCTP-GDH-eGFP可以准确定位到水稻叶绿体,但其转运效率低于RCTP-eGFP的转运效率,叶绿体和细胞质中的融合蛋白RCTP-GDH-eGFP都易于聚集而呈斑点状.本研究为进一步应用集胞藻gdh基因改造C3作物光呼吸代谢途径,抑制C3作物光呼吸速率,提高作物光合速率奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	侯典云	河南科技大学农学院	57	168	8.0	10.0
2	胥华伟	河南科技大学农学院	36	134	7.0	9.0