wnt5a诱导心肌祖细胞向心肌细胞分化的作用研究

• 作者: 何通川 刘玲娟 向平 吕铁伟 吴良宇 房松华 李谧 田杰
• 来源期刊: 解放军医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: wnt5a 心肌祖细胞 心肌细胞
• 年，卷（期）: 2018,（4）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 316-321
• 页数: 6页
• 分类号: R541.6
• 字数: 4293字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11855/j.issn.0577-7402.2018.04.09

摘要

目的 探讨wnt5a诱导心肌祖细胞CP15-5a向心肌细胞分化的作用.方法 利用HEK293细胞扩增重组腺病毒Ad-wnt5a和Ad-GFP;转染CP15-5a细胞后,设置wnt5a组、GFP组和空白对照组.采用流式细胞技术检测Ad-wnt5a和Ad-GFP的转染效率;1周后,通过实时定量PCR(qRT-PCR)检测经Ad-wnt5a诱导的CP15-5a细胞中心肌组织特异性转录因子GATA结合蛋白4(GATA4)、心肌增强因子2C(MEF2C)的表达;2周后,通过Western blotting及免疫荧光技术检测经Ad-wnt5a诱导的CP15-5a细胞中心肌连接因子43(CX43)、心肌肌钙蛋白T(cTnT)的表达;全细胞膜片钳技术检测钠电流(INa)表达.结果 Ad-wnt5a和Ad-GFP转染效率分别为42.8％、44.3％.腺病毒转染CP15-5a细胞1周后,wnt5a组GATA4和MEF2C基因的表达量(分别为1.717±0.220、1.847±0.190)较GFP组和空白对照组(GATA4:1.003±0.087、0.961±0.063,P＜0.05;MEF2C:0.456±0.042、0.500±0.095,P＜0.05)明显升高,而GFP组与空白对照组比较差异无统计学意义;腺病毒转染2周后,wnt5a组CX43和cTnT蛋白的表达量(分别为1.597±0.267、0.727±0.100)较GFP组和空白对照组(CX43:0.723±0.047、0.783±0.1333,P＜0.05;cTnT:0.217±0.021和0.253±0.102,P＜0.01)明显升高,而GFP组与空白对照组比较差异无统计学意义.与GFP组及空白对照组比较,wnt5a组可检测出INa.结论 wnt5a可诱导心肌祖细胞CP15-5a向心肌细胞分化.