山羊DCT基因启动子活性区及其转录因子调控探究

• 作者: 刘春杨 周荣艳 张乐超 李兰会 李祥龙 王麒
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 山羊 DCT基因 启动子 SOX10 MITF OTX2
• 年，卷（期）: 2018,（1）
• 所属期刊栏目: 遗传育种
• 页码范围: 55-64
• 页数: 10页
• 分类号: S827.2
• 字数: 7195字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11843/j.issn.0366-6964.2018.01.007

摘要

旨在探究山羊DCT基因启动子活性区及相关转录因子对该基因的调控作用,为山羊DCT基因的表达调控提供理论依据.通过对山羊DCT基因5'侧翼区序列及第一外显子区序列进行生物信息学分析,并与人和小鼠DCT基因启动子序列进行比对,同时结合在线启动子预测结果,采用快速克隆的方法构建5个5'系列缺失序列的启动子报告基因载体,以此为基础构建3'缺失序列的6个报告基因载体,并构建SOX10、MITF和OTX2转录因子结合位点点突变的6个报告基因载体,以瞬时转染的方法转染A375细胞,双荧光素酶检测试剂盒检测缺失片段和点突变片段的启动子活性.结果表明,成功构建了山羊DCT基因11个不同长度的启动子报告基因载体,-990～+232 bp的P3片段荧光素酶活性极显著高于其他片段(P＜0.01),基于P3构建的3'系列缺失片段中-881～-154 bp的P8片段荧光素酶活性极显著高于其他片段(P＜0.01).转录因子SOX10结合位点突变的载体荧光素酶活性极显著降低(P＜0.01),MITF和OTX2结合位点突变的载体荧光素酶活性极显著增强(P＜0.01).山羊DCT基因启动子核心调控区位于-881～-154bp区域,转录因子SOX10对山羊DCT基因发挥正调控作用,而转录因子MITF和OTX2对山羊DCT基因的调控作用尚需深入研究.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李兰会	河北农业大学动物科技学院	120	583	13.0	17.0
2	周荣艳	河北农业大学动物科技学院	105	307	9.0	11.0
3	刘春杨	河北农业大学动物科技学院	9	20	3.0	4.0
4	李祥龙		85	260	9.0	11.0
5	王麒	河北农业大学动物科技学院	7	16	2.0	3.0
6	张乐超	河北农业大学动物科技学院	10	23	3.0	4.0