O型口蹄疫病毒VP1蛋白在大肠埃希菌中的可溶性表达、纯化及纳米样结构观察

• 作者: 明胜利 杨国宇 郭婉莹 郭玉堃 郭豫杰
• 来源期刊: 解剖学报
• 学科: 农学
• 关键词: O型口蹄疫病毒 VP1蛋白 铁蛋白 融合标签 纳米颗粒 电子显微镜 大肠埃希菌
• 年，卷（期）: 2018,（1）
• 所属期刊栏目: 生物工程学
• 页码范围: 118-123
• 页数: 6页
• 分类号: S855.3
• 语种: 中文
• DOI: 10.16098/j.issn.0529-1356.2018.01.020

摘要

目的 本实验旨在高效表达可溶性的O型口蹄疫病毒VP1蛋白,并形成纳米样颗粒.方法 根据O型口蹄疫病毒核酸序列,得到FMDV O/MYA/7/98株的VP1蛋白基因,并进行截短和优化,共73个氨基酸;同时,从肠道沙门菌(Salmonella enterica)中分离得到135个氨基酸铁蛋白(Fn)基因片段,将O型口蹄疫病毒VP1蛋白与铁蛋白串联,设计并合成了口蹄疫病毒VP1蛋白-铁蛋白基因片段,命名为SeFnt16798.构建了SeFnt16798融合Grifin、GST、MBP、Sumo、Thioredoxin、γ-crystallin、ArsC、PpiB、CeHSP17等9种不同可溶性标签的表达重组载体.分别转化至大肠埃希菌BL21(DE3)中,异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导,SDS-PAGE电泳对融合蛋白的可溶性表达进行检测,筛选高效可溶性表达的SeFnt16798融合蛋白.重组蛋白通过Ni-NTA Agarose亲和纯化,进行电子显微镜检测.结果 实验成功构建9个SeFnt16798表达载体;9个标签中,MBP与SeFnt16798蛋白相融合的可溶性表达效果最好,并获得了高纯度的MBP-SeFnt16798重组蛋白质;电子显微镜结果显示,MBP-SeFnt16798形成了纳米样颗粒.结论 本实验建立了稳定获得SeFnt16798重组蛋白质的方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨国宇	河南农业大学农业部动物生化与营养重点开放实验室	174	1205	16.0	28.0
2	郭豫杰	河南农业大学农业部动物生化与营养重点开放实验室	55	124	5.0	8.0
3	明胜利	河南农业大学农业部动物生化与营养重点开放实验室	5	6	1.0	2.0
4	郭婉莹	河南农业大学农业部动物生化与营养重点开放实验室	6	9	2.0	3.0
5	郭玉堃	河南农业大学农业部动物生化与营养重点开放实验室	5	9	2.0	3.0