文昌鱼中一个2A肽介导的多基因表达载体构建

• 作者: 华俊豪 李光 王义权
• 来源期刊: 厦门大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 多基因表达载体 2A肽 热激启动子 共表达 文昌鱼
• 年，卷（期）: 2018,（1）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 44-49
• 页数: 6页
• 分类号: Q782
• 字数: 3703字
• 语种: 中文
• DOI: 10.6043/j.issn.0438-0479.201702023

摘要

2A肽(P2A)介导的多基因表达载体具有高裂解活性且上、下游基因等摩尔表达等优点,已广泛应用于动物转基因研究.文昌鱼(amphioxus)作为一种新兴的模式动物,尚无应用这种表达载体的报道,为此在pXT7转录系统基础上构建一个P2A介导的多基因表达载体.将体外转录的P2A介导的mRNA注入文昌鱼卵细胞并受精后,经激光共聚焦显微镜和蛋白质免疫印迹(Western blot)检测表明,该mRNA在文昌鱼胚胎中能够高效地翻译和剪切,并且在信号肽的作用下eGFP蛋白定位于细胞核中,而mCherry蛋白定位于细胞膜上,上、下游蛋白间的剪切效率达到91％;进而构建了由文昌鱼热激蛋白基因启动子(BbHsp70)启动,并由P 2 A介导的多基因表达载体,实验证明其在热诱导和上、下游蛋白剪切方面均达到了预期效果.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王义权	厦门大学生命科学学院细胞应激生物学国家重点实验室	42	856	16.0	28.0
2	李光	厦门大学生命科学学院细胞应激生物学国家重点实验室	11	70	4.0	8.0
3	华俊豪	厦门大学生命科学学院细胞应激生物学国家重点实验室	1	2	1.0	1.0