结核分枝杆菌多聚磷酸盐激酶2核酸适配体的抗结核效果评价

• 作者: 万秋 刘静姝 李岱容 杨扬 陈雨晗 黎友伦
• 来源期刊: 上海交通大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 多聚磷酸盐激酶 核酸适配体 结核分枝杆菌 抑菌活性
• 年，卷（期）: 2018,（1）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 36-41
• 页数: 6页
• 分类号: R378.91+1
• 字数: 4799字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-8115.2018.01.007

摘要

目的·探讨结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)多聚磷酸盐激酶2(polyphosphate kinase 2,PPK2)核酸适配体对体外MTB的抑菌效果.方法·运用生物信息学方法分析MTB PPK2与呼吸道部分常见病原菌的同源性,构建PPK2进化树.通过酶联寡核苷酸分析(enzyme-linked oligonucleotide assay,ELONA)测定PPK2核酸适配体与MTB标准株H37Rv、卡介苗(BCG)、耻垢分枝杆菌、铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌的结合亲和力.将PPK2核酸适配体加入血清中孵育24 h,运用琼脂糖凝胶电泳分析其在血清中的生物稳定性.采用微量刃天青显色法测定PPK2核酸适配体对H37Rv的最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC).将H37Rv与1μ.mol/L的PPK2核酸适配体在罗氏培养基上培养10d,观察菌落生长情况.运用酶标仪测定与不同浓度的PPK2核酸适配体共培养10d后H37Rv菌液的D(600 nm)值,观察PPK2核酸适配体对H37Rv生长的影响.结果·生物信息学方法构建的PPK2进化树显示,H37Rv的PPK2蛋白与呼吸道部分常见病原菌亲缘性较远,与铜绿假单胞菌亲缘关系相对较近.ELONA测定结果显示PPK2核酸适配体能与H37Rv选择性结合.琼脂糖凝胶电泳分析显示PPK2核酸适配体在血清中至少稳定存在8h.PPK2核酸适配体对H37Rv的MIC为50 nmol/L.罗氏培养基菌落生长结果显示PPK2适配体对H37Rv生长具有抑制作用.生长抑制试验表明随着PPK2核酸适配体浓度增加,H37Rv的D(600 nm)呈现下降趋势,说明PPK2核酸适配体对H37Rv生长存在抑制作用.结论·PPK2核酸适配体对体外H37Rv表现出良好的抑菌活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黎友伦	重庆医科大学附属第一医院呼吸与危重症医学科	67	377	10.0	16.0
2	李岱容	重庆医科大学附属第一医院呼吸与危重症医学科	29	94	6.0	8.0
3	杨扬	重庆医科大学附属第一医院呼吸与危重症医学科	19	119	6.0	10.0
4	万秋	重庆医科大学附属第一医院呼吸与危重症医学科	4	5	1.0	2.0
5	陈雨晗	重庆医科大学附属第一医院呼吸与危重症医学科	3	2	1.0	1.0
6	刘静姝	重庆医科大学附属第一医院呼吸与危重症医学科	2	1	1.0	1.0