丙酮酸激酶M1(PKM1)对眼黑色素瘤细胞迁移的影响

• 作者: 刘丹 刘园园 刘莹 叶棋浓 徐小洁 朱晓雨 李玲
• 来源期刊: 眼科新进展
• 学科: 医学
• 关键词: 眼B16黑色素瘤细胞 丙酮酸激酶M1基因 克隆 真核表达
• 年，卷（期）: 2018,（1）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 27-30
• 页数: 4页
• 分类号: R739.7
• 字数: 3372字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13389/j.cnki.rao.2018.0005

摘要

目的 构建带有pXJ-40-myc标签的丙酮酸激酶M1(pyruvate kinase M1,PKM1)基因真核表达载体,并初步探讨PKM1对眼黑色素瘤的影响.方法 将传代培养的眼B16黑色素瘤细胞随机分为实验组(转染pXJ-40-myc-PKM1重组质粒)和对照组(转柒pXJ-40-myc空载质粒);以人肝cDNA文库为模板应用PCR扩增出PKM1基因的CDS编码区序列,应用菌液PCR、双酶切鉴定,分别将pXJ-40-myc-PKM1重组质粒和pXJ-40-myc空载质粒瞬时转染眼B16黑色素瘤细胞,Western blot检测其表达,应用划痕实验法检测PKM1对眼B16黑色素瘤细胞转移的影响.结果 PCR技术扩增出长1800 bp的PKM1基因,与预期大小一致;与对照组相比,菌液PCR结果为阳性,双酶切切出的条带分别为4000 bp和1800 bp;与对照组相比,Western blot检测结果为重组质粒pXJ-40-myc-PKM1在眼B16黑色素瘤细胞成功表达.与对照组相比,划痕实验结果为重组质粒pXJ-40-myc-PKM1抑制眼B16黑色素瘤细胞的迁移.结论 成功构建了pXJ-40-myc-PKM1真核表达载体,并证明该基因抑制眼B16黑色素瘤细胞的迁移.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘园园		3	2	1.0	1.0
2	朱晓雨		3	4	2.0	2.0
3	刘莹		9	2	1.0	1.0
4	徐小洁		2	2	1.0	1.0
5	李玲		2	2	1.0	1.0
6	叶棋浓		2	2	1.0	1.0
7	刘丹		9	35	4.0	5.0